[發明專利]一種柞蠶蛹蟲草生物活性肽的制備方法

在審

• 申請號: 202010573543.8
• 申請日: 2020-06-22
• 公開（公告）號: CN111690705A
• 公開（公告）日: 2020-09-22
• 發明（設計）人: 王美景;柳葉飛;王升厚;徐方旭;王澤;趙曉云;王萍萍;辛意貝;余柳柳
• 申請（專利權）人: 沈陽師范大學;沈陽蟲林密寶北蟲草食品科技有限公司
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K1/16
• 代理公司: 沈陽維特專利商標事務所(普通合伙) 21229
• 代理人: 甄玉荃

1.一種柞蠶蛹蟲草生物活性肽的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

1)以活體柞蠶蛹作為培養基，接種功能性蛹蟲草“素高1號”液體菌種，經常規培養得子座完整的柞蠶蛹蟲草；

2)將步驟1)中的柞蠶蛹蟲草子座進行冷凍干燥后，粉碎，得干粉；

3)取步驟2)中的干粉，加去離子水后，加入堿性蛋白酶和胰蛋白酶兩種蛋白酶進行酶解，得酶解液；

4)將步驟3)中的酶解液經粗過濾以及離心去除固態渣子，留上清液；

5)取步驟4)中的上清液依次注入分子量10萬道爾頓的超濾柱、分子量1萬道爾頓的超濾柱以及分子量1000道爾頓的超濾柱過濾，得小分子生物活性肽類混合液；

6)在無菌條件下，將步驟5)中的小分子生物活性肽類混合液，采用細菌過濾器進行除菌，得成品。

2.根據權利要求1所述柞蠶蛹蟲草生物活性肽的制備方法，其特征在于，在步驟6)之后將所述成品放入真空冷凍干燥機中，制備成肽類冷凍干燥粉。

3.根據權利要求1所述柞蠶蛹蟲草生物活性肽的制備方法，其特征在于，步驟1)中以活體柞蠶蛹作為培養基，接種功能性蛹蟲草“素高1號”液體菌種后，在溫度為15℃～20℃、濕度為70％～90％條件下，培養55天～60天，培養得子座完整的柞蠶蛹蟲草。

4.根據權利要求1所述柞蠶蛹蟲草生物活性肽的制備方法，其特征在于，步驟2)中所述冷凍干燥的環境為：溫度為-25℃，真空度為10-12Pa，高壓均質壓力為1.2×10⁵KPa。

5.根據權利要求1所述柞蠶蛹蟲草生物活性肽的制備方法，其特征在于，步驟2)中粉碎得干粉的溫度為-10℃至-20℃，干粉的細度為120目。

6.根據權利要求1所述柞蠶蛹蟲草生物活性肽的制備方法，其特征在于，按重量計，步驟3)中蛋白酶的加入量為干粉的6％，其中，堿性蛋白酶和胰蛋白酶的加入量為1:1，且先加入堿性蛋白酶后，再加入胰蛋白酶。

7.根據權利要求6所述柞蠶蛹蟲草生物活性肽的制備方法，其特征在于，堿性蛋白酶和胰蛋白酶的酶解溫度均為55℃，按規定順序酶解時間均為2h，底物濃度為10％。

8.根據權利要求1、6或7中任一所述柞蠶蛹蟲草生物活性肽的制備方法，其特征在于，所述堿性蛋白酶為食品級20萬U，所述胰蛋白酶為食品級10萬U。

9.根據權利要求1所述柞蠶蛹蟲草生物活性肽的制備方法，其特征在于，步驟6)中采用的細菌過濾器為0.22微米的細菌過濾器。