[發明專利]利用改進的En值判定檢測結果準確度的方法

有效

• 申請號: 202010573096.6
• 申請日: 2020-06-22
• 公開（公告）號: CN111718975B
• 公開（公告）日: 2023-01-17
• 發明（設計）人: 王寵;戰錫林;王在峰;李圣增
• 申請（專利權）人: 山東省濟南生態環境監測中心
• 主分類號: C12Q1/06
• 分類號: C12Q1/06;C12Q1/10;G06F17/18;C12R1/19
• 代理公司: 北京智橋聯合知識產權代理事務所(普通合伙) 11560
• 代理人: 江莉莉

本發明涉及一種改進的En值判定檢測結果準確度的方法，該方法主要應用于最大可能數（MPN）法測定微生物指標結果準確性的評價。由于傳統En值評價方法只能適用于不確定度屬于對稱分布的情況，對于MPN值的不確定度為非對稱分布的情況，傳統En值評價方法卻無法適用。因此本發明對En值進行了改進，使得所提供的評價方法也能適用于不確定度為非對稱分布的情況。改進的En值可以適用于被測物品的參考值的不確定度和測量結果的不確定度任何一個或兩者均為非對稱分布的情況。具體適用于評價MPN法測定微生物指標的能力驗證/能力考核結果，還可以用于日常質控樣品的準確度評價。

技術領域

本發明涉及一種利用改進的En值判定檢測結果準確度的方法，主要應用于最大可能數(MPN)法測定微生物指標結果準確性的評價。

背景技術

最大可能數(MPN)法很早就應用于總大腸菌群和糞大腸菌群等微生物分析項目，該方法是多管發酵法和酶底物法(HJ 1001-2018水質總大腸菌群、糞大腸菌群和大腸埃希氏菌的測定酶底物法[S].HJ1001-2018Water quality—Determination of totalcoliforms,fecal coliforms and Escherichia coli—Enzyme substrate method[S])的理論基礎，獲得了廣泛應用。該方法不同于平板計數法用菌落數量直觀表示測量結果，而是通過概率理論而獲得最大可能數值，同時給出該測量結果的置信區間，可以是95％概率(包含因子k＝2)和99％概率(包含因子k＝3)，該置信區間可以作為MPN值的擴展不確定度使用[胡巔,李素芳,丁武.MPN法檢測結果的不確定度及其評定[J].現代預防醫學.2013,40(10)：1939-1942.HU Dian,LI Su-fang,DING Wu.The uncertainty and its evaluationon the testing result by the MPN determination[J].Modern PreventiveMedicine.2013,40(10)：1939-1942]。該不確定度的分布與常見的正態、三角型、梯形、矩形等對稱分布不同，它屬于不對稱分布，其形狀類似于色譜分析中的拖尾峰，表現為MPN值與置信下限的差值小，而與置信上限的差值大。這也符合微生物測定結果大多屬于偏態分布的特征。在對微生物項目測量結果評價時，目前常見的處理方式是將測量結果轉換成對數，使其近似對稱分布或近似正態分布后，再進行精密度或準確度評價。但是，這種處理方式能否客觀反映原來數據的特性，尚有一定的不確定性。

糞大腸菌群直接來源于糞便，被廣泛應用為衡量水體糞便污染的指示微生物，水體存在糞大腸菌群表明水體已被糞便污染，該項目是地表水環境質量標準、污水綜合排放標準等各類標準的監測指標。多管發酵法是傳統的糞大腸菌群檢測方法，因具有不受濁度影響,可以檢驗濁度較大水樣,價格便宜等優點，被廣泛使用。本申請人的單位組織8家實驗室開展了糞大腸菌群(MPN法)的能力考核，嘗試用各種統計方法如穩健統計方法、改進的經典統計法和En值法等進行評價。然而，穩健統計方法主要適用于15家以上實驗室參加的能力驗證/能力考核的結果評價；改進的經典統計法雖然適用于10家左右的實驗室參加的能力驗證/考核結果評價，但一般適用于有精密度限值的化學分析項目；En值法適用于1家實驗室參加的測量審核，該方法與上述2種方法區別在于考慮了參加實驗室的不確定度，需實驗室提供測量結果的不確定度，與指定值的不確定度共同使用，且這2個不確定度屬于對稱分布時才能使用，而目前微生物的定量標準菌株的量值為多家實驗室共同協作測定獲得，給出的不確定度大多為對稱分布，而MPN值的不確定度為非對稱分布，因此，前述3種評價方法均不能應用于MPN法準確度評價。

于慧霞等人發表了《生活飲用水中總大腸菌群不確定度的評定》，該文章中指出，采用GB5750-2006《生活飲用水標準檢驗方法》中51孔定量盤法測總大腸桿菌群。相比發酵法，該方法操作簡便，24小時可報結果。