[發(fā)明專利]一種藤梨根抗腫瘤轉(zhuǎn)移活性物質(zhì)的提取方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010569500.2
• 申請日: 2020-06-20
• 公開（公告）號: CN111494443A
• 公開（公告）日: 2020-08-07
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 甘椿椿;魏曉鵬;姚水洪;金湛;章立新;朱美香;姜莉苑;陳高
• 申請（專利權(quán)）人: 衢州職業(yè)技術(shù)學(xué)院;天津醫(yī)科大學(xué)
• 主分類號: A61K36/185
• 分類號: A61K36/185;A61P35/00;A61K125/00
• 代理公司: 西安匯恩知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 61244
• 代理人: 張延長

1.一種藤梨根抗腫瘤轉(zhuǎn)移活性物質(zhì)的提取方法，其特征在于，包括如下步驟：

S1、稱取干燥粉碎的藤梨根藥材適量，加入藤梨根藥材質(zhì)量的50-60％的水，正負(fù)壓循環(huán)處理3次后，加入真菌蛋白酶，酶解2h后，加入果膠酶，2h后，滅酶，得酶解液；

S2、向酶解液中加入藤梨根藥材質(zhì)量的10-15％的酵母菌，拌勻，25-35℃保溫發(fā)酵培養(yǎng)6-12h，期間每隔2h負(fù)壓-常壓處理1次，冷凍干燥，得粉劑；

S3、將所得的粉劑用95％的乙醇加熱回流提取3次，每次2h，過濾，合并提取液，減壓濃縮，得浸膏；

S4、用適量蒸餾水混懸浸膏，用相同體積水飽和的正丁醇分別萃取3次，回收溶劑，分別得到正丁醇部位；

S5、將正丁醇部位經(jīng)大孔吸附樹脂梯度洗脫得Fr.1～5，F(xiàn)r.4經(jīng)硅膠柱層析得Fr.4.1～4.5，F(xiàn)r.4.1經(jīng)Sephadex LH-20凝膠柱分離，即得。

2.如權(quán)利要求1所述的一種藤梨根抗腫瘤轉(zhuǎn)移活性物質(zhì)的提取方法，其特征在于，所述步驟S1中，正負(fù)壓循環(huán)處理中正壓處理的壓強(qiáng)為1～3Mpa，處理時(shí)間為5min，負(fù)壓處理的壓強(qiáng)為0.1～0.3Mpa，處理時(shí)間為5min,正壓處理結(jié)束后，瞬間進(jìn)入負(fù)壓處理。

3.如權(quán)利要求1所述的一種藤梨根抗腫瘤轉(zhuǎn)移活性物質(zhì)的提取方法，其特征在于，所述步驟S2中，所述負(fù)壓-常壓處理中負(fù)壓處理的壓強(qiáng)為0.1～0.3Mpa，處理時(shí)間為5min，負(fù)壓處理結(jié)束后，瞬間恢復(fù)成常壓狀態(tài)。

4.如權(quán)利要求1所述的一種藤梨根抗腫瘤轉(zhuǎn)移活性物質(zhì)的提取方法，其特征在于，所述步驟S5中，將正丁醇部位經(jīng)大孔吸附樹脂，MeOH-H2O 0:100→100:0梯度洗脫得Fr.1～5，F(xiàn)r.4經(jīng)300～400目硅膠柱層析，DCM-MeOH 50:1→2:1得Fr.4.1～4.5，F(xiàn)r.4.1經(jīng)SephadexLH-20凝膠柱，DCM-MeOH 1:1洗脫，即得。

5.如權(quán)利要求1所述的一種藤梨根抗腫瘤轉(zhuǎn)移活性物質(zhì)的提取方法，其特征在于，所述步驟S2中，真菌蛋白酶的添加量為藤梨根藥材質(zhì)量的1/10，酶解溫度為35～37℃。

6.如權(quán)利要求1所述的一種藤梨根抗腫瘤轉(zhuǎn)移活性物質(zhì)的提取方法，其特征在于，所述步驟S2中，果膠酶的添加量為藤梨根藥材質(zhì)量的1/10，酶解溫度為35～37℃。