[發(fā)明專利]一種殼寡糖修飾的白樺脂酸藥物運(yùn)輸體系的制備方法及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010569071.9
• 申請(qǐng)日: 2020-06-19
• 公開（公告）號(hào): CN111643679B
• 公開（公告）日: 2022-09-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊鑫;程建軍;劉秀
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 哈爾濱工業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): A61K47/69
• 分類號(hào): A61K47/69;A61K47/61;A61K47/54;A61K31/56;A61K31/337;A61K41/00;A61P35/00
• 代理公司: 哈爾濱龍科專利代理有限公司 23206
• 代理人: 高媛

本發(fā)明公開了一種殼寡糖修飾的白樺脂酸藥物運(yùn)輸體系的制備方法及其應(yīng)用，本發(fā)明在活性殼寡糖的基礎(chǔ)上修飾白樺脂酸，制備兩親性的活性單元分子，一方面可以聯(lián)合殼寡糖及白樺脂酸的抗癌活性，實(shí)現(xiàn)安全、高效地協(xié)同增強(qiáng)抗癌目的；另一方面借助分子的兩親性，可以以膠束或者自組裝的形式實(shí)現(xiàn)藥物運(yùn)輸?shù)哪康摹Ｗ鳛檩d藥體系，一方面可以運(yùn)載傳統(tǒng)化療藥物實(shí)現(xiàn)多重化療目的，增強(qiáng)抗癌療效；另一方面可以運(yùn)載光敏劑，從而在實(shí)現(xiàn)安全化療的基礎(chǔ)上、聯(lián)合光療等起到三重協(xié)同增強(qiáng)抗癌療效目的，有望克服并解決臨床癌癥治療。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥材料領(lǐng)域，涉及一種基于活性殼寡糖橋連天然小分子納米載體的制備方法及其協(xié)同抗癌應(yīng)用。

背景技術(shù)

當(dāng)前，癌癥是嚴(yán)重威脅人類生命安全的惡性疾病之一。基于化療、光療、熱療、免疫治療相結(jié)合的腫瘤治療方式已被廣泛探索并用于臨床癌癥治療。但傳統(tǒng)的化療藥物(如：紫杉醇、鹽酸多柔比星等)存在生物利用度低且毒副作用大等缺陷，即使是基于此的聯(lián)合治療也往往呈現(xiàn)一定的副作用。因而，探尋安全、高效的化療藥物，并與光療或熱療相結(jié)合，實(shí)現(xiàn)癌癥治愈意義重大。

殼寡糖(chitosan oligosaccharides,COS)，作為自然界中唯一帶正電荷陽離子堿性氨基低聚糖，具有優(yōu)良的生物活性，如抗氧化、消炎、降低膽固醇和增強(qiáng)機(jī)體免疫活性、抗腫瘤的活性等。此外，其良好的生物相容性、無毒、對(duì)活體器官的不致敏特性，也使其成為納米工程中一種潛在的藥物運(yùn)輸載體和組織支架。然而，其本身的高水溶性特性，也極大程度限制其作為納米藥物運(yùn)輸體系的制備。因而，對(duì)其結(jié)構(gòu)修飾并引入新的活性基團(tuán)十分有必要。

天然產(chǎn)物因來源于植物或動(dòng)物體，因而具有很好的生物相容性和生物易降解能力。其中，疏水性的小分子天然產(chǎn)物-白樺脂酸(Betulinic acid，BA)因具有優(yōu)良的抗癌活性，兼具本身天然的生物相容性被作為抗癌試劑廣泛報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種殼寡糖修飾的白樺脂酸藥物運(yùn)輸體系的制備方法及其應(yīng)用。本發(fā)明在活性殼寡糖的基礎(chǔ)上修飾白樺脂酸，制備兩親性的活性單元分子，一方面可以聯(lián)合殼寡糖及白樺脂酸的抗癌活性，實(shí)現(xiàn)安全、高效地協(xié)同增強(qiáng)抗癌目的；另一方面借助分子的兩親性，可以以膠束或者自組裝的形式實(shí)現(xiàn)藥物運(yùn)輸?shù)哪康摹Ｗ鳛檩d藥體系，一方面可以運(yùn)載傳統(tǒng)化療藥物(如紫杉醇、喜樹堿、鹽酸多柔比星)實(shí)現(xiàn)多重化療目的，增強(qiáng)抗癌療效；另一方面可以運(yùn)載光敏劑(如二氫卟吩e6，簡稱Ce6)，從而在實(shí)現(xiàn)安全化療的基礎(chǔ)上、聯(lián)合光療等起到三重協(xié)同增強(qiáng)抗癌療效目的，有望克服并解決臨床癌癥治療。

本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：

一種殼寡糖修飾的白樺脂酸藥物運(yùn)輸體系的制備方法，包括如下步驟：

步驟一、將白樺脂酸(BA)、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDC)、N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)溶于有機(jī)試劑丙酮、DMF或DMSO中，控制BA、EDC、NHS的摩爾比為1:1～4:0.5～4；

步驟二、將殼寡糖(COS，聚合度2～6)水溶液緩慢滴加至步驟一的有機(jī)試劑中，控制BA與COS的質(zhì)量比為1:2～5，隨后在冰浴下室溫?cái)嚢璺磻?yīng)20～30h；

步驟三、反應(yīng)完后，用石油醚：丙酮＝5:1(v/v)除去未反應(yīng)完的白樺脂酸和中間體副產(chǎn)物，用石油醚：丙酮＝3:1(v/v)分離出COS-BA；

步驟四、取COS-BA溶解在二甲基亞砜(DMSO)中，制備濃度為0.1～35mM的COS-BA母液；

步驟五、取COS-BA母液在超聲條件下快速滴加至二次蒸餾水中，控制DMSO與水的體積比為0.1～1:10(即0.1～100μl DMSO：1mL水)，經(jīng)超聲(1～25min)、離心，得到COS-BANPs。

一種以殼寡糖修飾的白樺脂酸藥物運(yùn)輸體系為載體的化療藥物的制備方法，包括如下步驟：