[發明專利]一種蛋雞卵巢氧化應激模型的建立方法

有效

• 申請號: 202010568938.9
• 申請日: 2020-06-19
• 公開（公告）號: CN111657229B
• 公開（公告）日: 2022-07-29
• 發明（設計）人: 王建萍;晏磊;賈茹;尹華東;丁雪梅;張克英
• 申請（專利權）人: 四川農業大學
• 主分類號: A01K67/02
• 分類號: A01K67/02
• 代理公司: 成都天匯致遠知識產權代理事務所(普通合伙) 51264
• 代理人: 韓曉銀

1.一種蛋雞卵巢氧化應激模型的建立方法，其特征在于，包括以下步驟：

選用產蛋高峰期即28周齡的曼粉蛋雞，采用單因素試驗設計，設6個處理，每個處理10個重復，每個重復1只雞，分別為1個對照組和5個叔丁基過氧化氫組，對照組飼喂生理鹽水，叔丁基過氧化氫組飼喂濃度確定為：100、200、400、800、1000μmol/kg 體重，分別于實驗8、15、22天早上9：00飼喂生理鹽水和叔丁基過氧化氫；最后一次飼喂后48h進行采樣；試驗期為24天，飼糧為玉米-豆粕型基礎飼糧，飼喂方式為定量飼喂；飼養管理按常規飼養管理進行；試驗開始預飼2周，前通過觀察記錄蛋雞產蛋率，按產蛋率進行隨機分組；

每天記錄產蛋率，通過ELISA方法測定雌二醇、孕酮、睪酮、瘦素、促卵泡激素、胰島素樣生長因子-1和抗穆氏霍爾蒙的濃度；最后一次飼喂生理鹽水和叔丁基過氧化氫后48h收集卵巢，HE染色后，用校正法對原始卵泡數量進行統計，并對前等級、等級卵泡計數和量取等級卵泡大小；利用HPLC和試劑盒方法測定卵巢中維生素C、維生素E、脂質過氧化產物，蛋白質羰基、抗氧化酶的含量或活性，抗氧化酶包括超氧化物歧化酶、過氧化氫酶、谷胱甘肽、谷胱甘肽硫轉移酶；

5個叔丁基過氧化氫組分別飼喂濃度為：100μmol/kg 體重、200μmol/kg 體重、400μmol/kg 體重、800μmol/kg 體重和1000μmol/kg 體重；

所述飼糧按照質量份包括以下組分：玉米59.064份、小麥麩皮3.867份、大豆油 1.50份、豆粕15.236份、玉米蛋白粉5.00份、玉米DDGS5.00份、粒狀石粉6.103份、粉狀石粉2.50份、粉狀磷酸氫鈣0.941份、氯化鈉0.250份、小蘇打0.100份、L-賴氨酸硫酸鹽0.162份、DL-蛋氨酸 0.012份、氯化膽堿0.100份、多維0.015份、礦添 0.15份；

所述的L-賴氨酸硫酸鹽的純度為70%；DL-蛋氨酸的純度為99%；氯化膽堿的純度為60%。

2.根據權利要求1所述的蛋雞卵巢氧化應激模型的建立方法，其特征在于，在飼養管理過程中，每周進行嚴格消毒，室溫保持在20~22℃，注意通風換氣。

3.根據權利要求1所述的蛋雞卵巢氧化應激模型的建立方法，其特征在于，所述的前等級包括小白、大白和小黃卵泡；等級卵泡包括F1~F7卵泡。