[發明專利]一種GC-MS/MS法檢測鹽酸吉西他濱中甲磺酸酯類基因毒性雜質的方法

有效

• 申請號: 202010568861.5
• 申請日: 2020-06-19
• 公開（公告）號: CN111707747B
• 公開（公告）日: 2022-06-24
• 發明（設計）人: 鐘振華;夏紅英;程奇珍;易路遙;劉緒平;潘蕾;余師師;熊欣;王鵬;陳珍珍;王烜;陳雨萍
• 申請（專利權）人: 江西省藥品檢驗檢測研究院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/72;G01N30/86
• 代理公司: 南昌金軒知識產權代理有限公司 36129
• 代理人: 牛永山

本發明涉及藥物分析技術領域，具體涉及一種GC?MS/MS法檢測鹽酸吉西他濱中甲磺酸酯類基因毒性雜質的方法，包括以下步驟：1)在鹽酸吉西他濱中加入1,2?二氯乙烷，進行超聲后，加入1,2?二氯乙烷定容得提取液，提取液過濾，得到供試品溶液；2)采用GC?MS/MS法測定步驟1)中的供試品溶液，采用外標法計算鹽酸吉西他濱中各甲磺酸酯類基因毒性雜質的含量；所用氣相色譜柱為VF?624ms色譜柱；所述甲磺酸酯類基因毒性雜質包括甲磺酸甲酯、甲磺酸乙酯、甲磺酸異丙酯、甲磺酸丙酯和甲磺酸丁酯。本發明提供的測定方法具有抗雜質干擾能力強，噪音低，專屬性強和靈敏度高的特點。

技術領域

本發明涉及藥物分析技術領域，具體涉及一種GC-MS/MS法檢測鹽酸吉西他濱中甲磺酸酯類基因毒性雜質的方法。

背景技術

遺傳毒性雜質(Genotoxic Impurities，GTIs)是指能引起遺傳毒性的雜質，在藥物活性成分合成中，基因毒性雜質(又成遺傳毒性雜質)可能由起始原料、中間產物、反應副產物、降解產物、試劑、溶劑和催化劑引入。與藥品中其他雜質相比，基因毒性雜質會造成人體DNA結構發生功能性改變，從而導致人類遺傳突變、染色體斷裂，染色體重排和致癌。因此，近年來，各國監管機構特別關注基因毒性雜質，如歐洲藥物委員會，美國食品藥品監督管理局。2013年11月，ICH發布了評估和控制藥物中的DNA活性(致突變)雜質以限制潛在的致癌風險M7(R1)，在缺乏支持基因毒性閥值存在的有力證據下，提出采用“毒理學關注閾值”(threshold of toxicological concern，TTC)作為基因毒性雜質的可接受限度。其含義為在人的一生(70歲)中，每天攝入1.5μg的基因毒性雜質，其致癌的風險是可接受的(1/10萬)。TTC概念用于界定所有未經研究，但具有致癌風險或其他毒性效果的化學品的可接受攝入量。

藥物中基因毒性雜質的殘留問題，已成為制藥行業所面臨的重大挑戰，自2008年羅氏生產的抗艾滋病藥物甲磺酸奈非那韋因被檢測出甲磺酸乙酯嚴重超標而從市場召回，2018年6月華海藥業纈沙坦中N-亞硝基二甲胺基因毒性雜質超標，導致相關制劑也從歐洲、美國和中國市場上被召回，2018年9月Torrent制藥公司三批次纈沙坦藥品中查出基因毒性雜質超標而從市場被召回。這三起事件給國內各大藥品生產企業敲響警鐘，隨著中國正式加入ICH，國內藥物研發相關法規政策也逐漸向ICH靠攏。近期國家藥典委員會官網發布了“關于《中國藥典》2020年版四部通則增修訂內容(第四批)的公示”，其中就包括了“遺傳毒性雜質控制指導原則審核稿”。綜上所述，基因毒性雜質的研究變得尤其重要。

甲磺酸酯類物質目前已被確認為基因毒性雜質，1999年，甲磺酸甲酯被世界衛生組織國際癌癥研究機構列入二類致癌物清單中，屬2A類致癌物(對人很可能致癌，此類致癌物對人致癌性證據有限，對實驗動物致癌性證據充分)，甲磺酸乙酯于1987年列為2B類致癌物(對人可能致癌，此類致癌物對人致癌性證據有限，對實驗動物致癌性證據并不充分；或對人類致癌性證據不足，對實驗動物致癌性證據充分)。有研究表明，甲磺酸酯類物質可作用于DNA分子的嘌呤基團，生成烷基化嘌呤，破壞DNA雙鏈的空間構象和穩定，誘發機體基因突變和癌癥。根據歐洲藥物委員會發行的關于GTI控制的指導原則，以及ICH發行的關于基因雜質(ICH M7)的指導原則的相關要求，甲磺酸酯類以藥物每日最大攝入量(MDD)為基礎，毒理性方面的閾值為1.5μg/day。