[發(fā)明專利]一種野山杏果肉黃酮類化合物的測定方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010568206.X
• 申請日: 2020-06-19
• 公開（公告）號(hào): CN111665306A
• 公開（公告）日: 2020-09-15
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 戴小華;彭斌;金科旭;束佳敏;王天琪;海婷玉
• 申請（專利權(quán)）人: 新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02;G01N30/06;G01N30/86
• 代理公司: 北京方圓嘉禾知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11385
• 代理人: 程華

1.一種野山杏果肉黃酮類化合物的測定方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟1、溶液的制備

1.1)對(duì)照品溶液的配制

稱取原花青素、蘆丁、柚皮苷二氫查爾酮、槲皮素4種對(duì)照品各10.00±0.20mg，用甲醇溶解并分別定容至25mL容量瓶中，搖勻，即得對(duì)照品溶液；

1.2)混標(biāo)儲(chǔ)備液

分別取上述步驟1.1)中溶液各2.50mL，混合均勻，制得含有原花青素106.00ug/ml、蘆丁103.00ug/ml、柚皮苷二氫查爾酮112.00ug/mL、槲皮素104.00ug/ml的混標(biāo)儲(chǔ)備液；

1.3)混標(biāo)中間液

準(zhǔn)確量取5mL混標(biāo)溶液甲醇定容至10mL，制得含有原花青素53.00ug/ml、蘆丁51.50ug/ml、柚皮苷二氫查爾酮56.00ug/mL、槲皮素52.00ug/ml混標(biāo)中間液；

1.4)混標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)工作液

分別取0.25、0.50、1.00、2.00mL中間液甲醇定容至10ml容量瓶，搖勻，配制標(biāo)準(zhǔn)工作液上機(jī)待測；

1.5)供試品溶液的配制

取1g野山杏干燥果肉，粉碎，過40目篩，加50％乙醇(料液比1:50)，70℃下超聲1h，超聲提取2次，抽濾，合并濾液旋蒸濃縮后，用甲醇定容至10mL，搖勻，制成供試品溶液，測定前用微孔濾膜(0.22μm)過濾，備用；

步驟2、色譜條件

2.1)檢測波長

取上述對(duì)照品溶液，采用二極管陣列檢測器對(duì)各成分吸收峰進(jìn)行掃描，通過3D圖譜對(duì)各對(duì)照品的吸收峰進(jìn)行分析，確定對(duì)照品溶液的最大吸收波長為273nm；

2.2)流動(dòng)相

采用甲醇-磷酸水溶液作為流動(dòng)相；

2.3)流速

在固定相和流動(dòng)相不變的情況下，流速為0.6-1.2mL/min；

2.4)柱溫

在流動(dòng)相和固定相不變的情況下，柱溫為25-35℃；

步驟3數(shù)據(jù)處理

采用Excel 2010、SigmaPlot 12.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的野山杏果肉黃酮類化合物的測定方法，其特征在于，步驟2中，所述的色譜條件為：Hubble C18，4.6mm×250mm，5μm色譜柱，流動(dòng)相A甲醇:B0.5％磷酸水溶液＝45:55，以1.0mL/min流速進(jìn)行等度洗脫，柱溫箱的溫度為35℃，檢測波長為273nm，進(jìn)樣量為10μL。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的野山杏果肉黃酮類化合物的測定方法，其特征在于，蘆丁、槲皮素、原花青素3種黃酮成分色譜峰在20min內(nèi)，線性范圍為0.52～56μg/mL，r＝0.9998～1，加樣回收率為92.13％～96.70％，RSD為0.89％～1.96％。