[發明專利]一種基于巖藻聚糖酶與蛋白酶的海參復合酶解方法

有效

• 申請號: 202010565103.8
• 申請日: 2020-06-19
• 公開（公告）號: CN111789235B
• 公開（公告）日: 2022-12-06
• 發明（設計）人: 常耀光;劉艷艷;申晶晶;薛長湖;陳廣寧;張玉瑩;王玉明
• 申請（專利權）人: 中國海洋大學
• 主分類號: A23P10/30
• 分類號: A23P10/30;A23L17/00;A23L33/00;A23J3/34;A23J3/04;A23L2/02;A23C9/152;A23C9/156
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明涉及海參復合酶解技術領域，尤其涉及一種基于巖藻聚糖酶與蛋白酶的海參復合酶解方法。首先用蛋白酶水解海參體壁蛋白，然后向酶解液內加入巖藻糖酶進一步酶解，得到復合酶解液。本發明在使用蛋白酶水解海參體壁蛋白質后，利用巖藻聚糖酶對海參巖藻聚糖進行降解，通過控制巖藻聚糖酶的添加量、酶解溫度等條件達到降低海參巖藻聚糖分子量及酶解液粘度的目標。

技術領域

本發明涉及海參復合酶解技術領域，尤其涉及一種基于巖藻聚糖酶與蛋白酶的海參復合酶解方法。

背景技術

海參是我國傳統滋補食品，研究證實海參中含有巖藻聚糖、巖藻糖基化硫酸軟骨素、膠原蛋白與皂苷等多種營養功效成分，具有增強免疫力、抗凝血、抗腫瘤、抗炎、抗氧化、抗破骨細胞形成以及預防乙醇型胃潰瘍等多種生理功能。隨著人們生活水平的提高及健康意識的增強，海參消費量近年來迅速增加。

海參酶解液是海參的主要深加工產品形式，海參經酶解，其功效成分從海參中釋放至酶解液中以溶液狀態存在，同時大分子物質被降解為小分子，易于人體吸收利用，相較泡發海參和即食海參，更適于老年人、兒童、病人等消化能力較弱的人群食用。海參酶解液經噴霧干燥后形成沖劑，也可調配至其他液體形式的食品中(如牛奶、飲料、酒等)增強其營養功能。當前，海參酶解液的制備主要通過單一或復合蛋白酶對海參進行水解。因蛋白占海參體壁干重的60-70％，因此蛋白酶被認為是海參酶解所必需的。然而，海參經蛋白酶酶解后，酶解液往往具有較高的粘度，嚴重影響著后續的澄清、脫色、超濾、濃縮及(或)殺菌等操作的效率與效果。

蛋白酶酶解后得到的酶解液其高粘度是由海參多糖引起的，尤其是海參巖藻聚糖。海參巖藻聚糖是海參中含有的一類由巖藻糖及硫酸基組成的多糖，約占海參干重的5-10％，其分子量超過1000kDa，巨大的分子量導致其水溶液具有明顯粘度。同時，海參巖藻聚糖具有抗腫瘤、抗胃潰瘍、增強神經干細胞活力和增強免疫力等功能，據目前報道，海參是唯一含有的巖藻聚糖的大宗動物性食品原料，因此海參巖藻聚糖被認為是海參的特征性功效成分。如使用酸解、氧化降解、物理降解等方式進行海參巖藻聚糖的降解，雖能夠使海參巖藻聚糖分子量下降從而降低粘度，但由于化學降解和物理降解規律性差、副反應多、多糖上的硫酸基等活性基團容易脫落，導致營養價值下降，甚至存在產生毒副作用未知的副產物的風險；上述降解還需要耐酸堿的特種容器或特殊設備，造成生產成本的增加。

巖藻聚糖酶是特異性水解巖藻聚糖的酶，該酶僅切割巖藻聚糖中的糖苷鍵，而不影響硫酸根等結構特征，而且巖藻聚糖酶降解巖藻聚糖還具有反應條件溫和、易于控制、易于放大等優點。現階段未見巖藻聚糖酶用于海參酶解的報道，且目前報道的內切-1,3-巖藻聚糖酶僅有兩種，均為野生型巖藻聚糖酶，分別來源于WenyingzhuangiafucanilyticaCZ1127^T和專利菌種SI-0098。野生酶需在巖藻聚糖底物的誘導下才可產內切-1,3-巖藻聚糖酶，酶的制備成本高、純化難度大，且產酶總量低、活力低，難以在大規模生產中應用。本發明所用的克隆表達酶具有獲取效率高、酶活力高和成本低等優點，適合在大規模生產中應用。

發明內容

本發明要解決的技術問題為海參經蛋白酶酶解后，酶解液往往具有較高的粘度，嚴重影響著后續的澄清、脫色、超濾、濃縮及(或)殺菌等操作的效率與效果。

為解決上述問題，本發明提供一種基于巖藻聚糖酶與蛋白酶的海參復合酶解技術，在使用蛋白酶水解海參體壁蛋白質后，利用巖藻聚糖酶對海參巖藻聚糖進行降解，通過控制巖藻聚糖酶的添加量、酶解時間等條件達到降低海參巖藻聚糖分子量及酶解液粘度的目標。

為達到上述目的，本發明具體通過以下技術方案實現：一種基于巖藻聚糖酶與蛋白酶的海參復合酶解方法，首先用蛋白酶水解海參體壁蛋白，然后向酶解液內加入巖藻糖酶進一步酶解，得到復合酶解液。其中，蛋白酶的作用是起到充分降解蛋白的效果；在蛋白降解的同時，海參巖藻聚糖從海參中釋放并溶解于酶解液，其后利用巖藻聚糖酶內切巖藻聚糖，實現對溶液中巖藻聚糖的進一步分解，從而有效降低海參酶解液的粘度。