[發(fā)明專利]一種冠狀病毒/流感病毒/鼻病毒核酸聯(lián)合檢測試劑盒及使用方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010559197.8
• 申請日: 2020-06-18
• 公開（公告）號: CN111808989A
• 公開（公告）日: 2020-10-23
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 韓勛領(lǐng);孫松松;顏蓉;李紅玉;羅鋒
• 申請（專利權(quán)）人: 重慶浦洛通基因醫(yī)學(xué)研究院有限公司
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11
• 代理公司: 重慶智慧之源知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 50234
• 代理人: 孫方

本發(fā)明提供一種冠狀病毒/流感病毒/鼻病毒核酸聯(lián)合檢測試劑盒，包括SARS?Cov?2、SARS?CoV、MERS?CoV、HCoV?HKU1、HCoV?OC43、HCoV?229E和HCoV?NL63七種冠狀病毒、甲型流感病毒、乙型流感病毒和鼻病毒的雙靶點特異性引物和探針，以及外源性內(nèi)參的特異性引物和探針。本發(fā)明還提供了一種冠狀病毒/流感病毒/鼻病毒核酸聯(lián)合檢測試劑盒的使用方法。具有特異性強、靈敏度高、操作簡單，結(jié)果分析明了、可靠性高等特點。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明應(yīng)用于基因檢測技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種冠狀病毒/流感病毒/鼻病毒核酸聯(lián)合檢測 試劑盒及使用方法。

背景技術(shù)

冠狀病毒(Cov)在自然界的感染非常廣泛，常見的哺乳類動物如犬、貓、鼠、豬、牛以及家禽類等都易感。近幾年來，又從白鯨、駱駝，尤其是蝙蝠體內(nèi)分離到多種類型的冠狀病毒。冠狀病毒感染后，能夠侵害機體的呼吸道、消化道、肝臟、腎臟以及神經(jīng)系統(tǒng)等多種器官，造成不同程度的病理性損傷，從而引起不同程度的病理性疾病，嚴重者甚至能造成死亡。冠狀病毒是成人普通感冒的主要病原之一，也可以引起兒童上呼吸道感染，一般很少波及下呼吸道。目前已發(fā)現(xiàn)的感染人類的冠狀病毒有7種：HCoV-229E、HCoV-OC43、 SARS-CoV、HCoV-NL63、HCoV-HKU1、MERS-CoV和SARS-Cov-2。

分子流行病學(xué)研究表明，人冠狀病毒主要感染嬰幼兒及免疫功能低下或缺陷者，既能感 染上呼吸道引起發(fā)熱、咳嗽、喉炎等普通感冒癥狀，又能感染下呼吸道引起支氣管炎、毛細 支氣管炎及肺炎等急性呼吸道癥狀。其中，SARS-CoV、MERS-CoV和SARS-Coc-2感染后 能夠引發(fā)呼吸系統(tǒng)和腎功能衰竭，嚴重者甚至造成死亡。除了SARS-CoV和MERS-CoV外，冠狀病毒在常見人呼吸道病毒感染中的平均檢出率為15％。因此，深入開展冠狀病毒及新出 現(xiàn)的冠狀病毒的分子流行病學(xué)調(diào)查，及時研發(fā)新的快速、靈敏的分子檢測技術(shù)對于闡釋冠狀 病毒跨種屬傳播的分子機制以及滿足快速診斷的要求等具有重要意義。

季節(jié)性流感是由流感病毒引起的一種常見的急性呼吸道傳染病。我國北方地區(qū)，季節(jié)性 流感多在冬季高發(fā)；而在南方地區(qū)，四季都有病例發(fā)生，夏季和冬季會出現(xiàn)流行高峰。季節(jié) 性流感的潛伏期約為1～3天，急性起病，通常表現(xiàn)為高熱、頭痛、肌痛、乏力等中毒癥狀， 可伴有咽痛、流涕、干咳、胃腸不適等癥狀。主要合并癥是細菌性肺炎、耳部感染、鼻竇感 染、脫水，老人、兒童、伴有某些基礎(chǔ)性疾病或體質(zhì)虛弱者感染流感病毒后容易發(fā)生嚴重的 并發(fā)癥，甚至死亡。2009年3月18日，墨西哥陸續(xù)發(fā)現(xiàn)甲型H1N1流感病毒感染病例，并出現(xiàn)多名患者死亡，隨后甲型H1N1流感疫情在全球較大范圍內(nèi)出現(xiàn)，世界衛(wèi)生組織也將流感大流行預(yù)警級別一度提至6級。我國已將甲型H1N1流感納入《中華人民共和國傳染病防治法》規(guī)定的乙類傳染病，并采取甲類傳染病的預(yù)防、控制措施。

流行性感冒病毒(Influenza virus)，簡稱流感病毒，是一種造成人類及動物患流行性感冒 的RNA病毒。流感病毒均為單鏈RNA，因此適宜采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應(yīng)進行病毒核酸 的擴增。人流感病毒分為甲(A)、乙(B)、丙(C)三型。禽流感(Avian influenza；AI)是禽流行性 感冒的簡稱，它是一種由甲型流感病毒的某種亞型(也稱禽流感病毒)引起的傳染性疾病。流 行性感冒的臨床癥狀易與普通感冒相混淆，特別是近年來出現(xiàn)急性、烈性的高致病性禽流感 病毒(HPAIV)感染人的事件，不但對養(yǎng)禽業(yè)帶來巨大的經(jīng)濟損失，而且是引起人類死亡的主要 原因之一，因此建立一種準確快速的流感病毒檢測方法意義重大。