[發明專利]一種過表達Hpgds的重組脂肪干細胞、制備方法及其應用有效
| 申請號: | 202010557698.2 | 申請日: | 2020-06-18 |
| 公開(公告)號: | CN111549000B | 公開(公告)日: | 2022-07-29 |
| 發明(設計)人: | 肖苒;歐陽龍;邱道靜;傅歆;楊志崗 | 申請(專利權)人: | 中國醫學科學院整形外科醫院 |
| 主分類號: | C12N5/10 | 分類號: | C12N5/10;C12N15/861;A61K35/28;A61P17/02;A61P3/10 |
| 代理公司: | 北京超凡宏宇專利代理事務所(特殊普通合伙) 11463 | 代理人: | 王煥 |
| 地址: | 100000*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 表達 hpgds 重組 脂肪 干細胞 制備 方法 及其 應用 | ||
1.一種過表達Hpgds基因的重組脂肪干細胞,其特征在于,所述重組脂肪干細胞是通過將Hpgds基因轉染到脂肪干細胞中獲得。
2.根據權利要求1所述的重組脂肪干細胞,其特征在于,所述脂肪干細胞來源于人體脂肪組織。
3.根據權利要求1所述的重組脂肪干細胞,其特征在于, Hpgds基因的載體為慢病毒載體。
4.根據權利要求3所述的重組脂肪干細胞,其特征在于,所述慢病毒載體包括pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP。
5.權利要求1-4任一項所述的重組脂肪干細胞的制備方法,其特征在于,
構建表達Hpgds基因的慢病毒載體;
將所述表達Hpgds基因的慢病毒載體感染脂肪干細胞;
獲得表達Hpgds基因的重組脂肪干細胞。
6.根據權利要求5所述的方法,其特征在于,所述方法還包括提取脂肪干細胞的步驟,所述提取脂肪干細胞采用膠原酶消化法。
7.根據權利要求6所述的方法,其特征在于,所述膠原酶消化的溫度為36-38℃;消化時間為1-1.5小時。
8.根據權利要求6所述的方法,其特征在于,所述提取脂肪干細胞步驟之后還包括對提取獲得的脂肪干細胞進行鑒定,包括成骨和成脂的鑒定。
9.根據權利要求5所述的方法,其特征在于,所述表達Hpgds基因的慢病毒載體感染的感染復數值為300-400。
10.一種修復糖尿病創面組織的藥物,其特征在于,包括權利要求1-4任一項所述的重組脂肪干細胞。
11.根據權利要求10所述的修復糖尿病創面組織的藥物的制備方法,其特征在于,包括以下步驟:
a. 構建過表達Hpgds基因的重組脂肪干細胞;
b. 將所述重組脂肪干細胞與水凝膠支架混合,得到修復糖尿病創面組織的藥物。
12.根據權利要求11所述的修復糖尿病創面組織的藥物的制備方法,其特征在于,所述水凝膠支架為無動物源性RGD肽修飾多糖三維立體支架。
13.根據權利要求1-4任一項所述的重組脂肪干細胞在制備用于修復生物組織的藥物中的應用。
14.根據權利要求1-4任一項所述的重組脂肪干細胞在制備用于修復糖尿病創面組織的藥物中的應用。
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