[發(fā)明專利]MRNA遞送的脂質(zhì)納米顆粒組合物和方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010553959.3
• 申請(qǐng)日: 2012-06-08
• 公開（公告）號(hào): CN111671918A
• 公開（公告）日: 2020-09-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: B·C·吉爾德;F·德羅莎;M·哈特萊因
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 川斯勒佰爾公司
• 主分類號(hào): A61K48/00
• 分類號(hào): A61K48/00;A61K9/51;A61K9/127;A61P3/00
• 代理公司: 北京市君合律師事務(wù)所 11517
• 代理人: 何箏;趙昊

本文公開在靶細(xì)胞中調(diào)節(jié)蛋白的產(chǎn)生的組合物和方法。本文公開的組合物和方法能夠減輕與蛋白或酶缺乏相關(guān)的疾病。

本申請(qǐng)是申請(qǐng)?zhí)枮?01280036309.5、申請(qǐng)日為2012年6月8日、發(fā)明名稱為“MRNA遞送的脂質(zhì)納米顆粒組合物和方法”的中國(guó)發(fā)明專利申請(qǐng)的分案申請(qǐng)，原申請(qǐng)為國(guó)際申請(qǐng)?zhí)枮镻CT/US2012/041724的國(guó)家階段申請(qǐng)，該國(guó)際申請(qǐng)要求申請(qǐng)日為2011年6月8日，申請(qǐng)?zhí)枮?1/494,881的美國(guó)臨時(shí)專利申請(qǐng)的優(yōu)先權(quán)。

治療蛋白和酶缺乏仍然需要新的途徑和治療方法。例如，溶酶體沉積病是由溶酶體功能缺乏導(dǎo)致的約50種的一組稀有遺傳性代謝疾病，通常由于代謝所需酶缺乏導(dǎo)致。法布里病(Fabry disease)是酶α半乳糖苷酶(GLA)缺乏導(dǎo)致的溶酶體沉積病，其導(dǎo)致稱為神經(jīng)酰胺三己糖苷(globotriaosylceramide)的糖脂在血管和其他組織中積累，從而引起各種令人痛苦的臨床癥狀。對(duì)于某些疾病，類似于法布里病，有需求代替蛋白或酶，該蛋白或酶通常通過細(xì)胞分泌至血流內(nèi)。增加受影響的蛋白或酶的水平或產(chǎn)量的治療，例如基因治療，能夠提供這些疾病的治療或者甚至治愈這些疾病。然而，為了該目的使用常規(guī)基因治療一直有多處限制。

常見基因治療包括使用DNA插入所需遺傳信息至宿主細(xì)胞內(nèi)。引入DNA內(nèi)的細(xì)胞通常被一定程度整合至一種或多種轉(zhuǎn)染的細(xì)胞的基因組內(nèi)，使得引入的遺傳物質(zhì)可在宿主中長(zhǎng)期作用。盡管這種持續(xù)的作用可以有巨大益處，但外源性DNA整合至宿主基因組內(nèi)也可具有許多不利作用。例如，將引入的DNA插入完整基因內(nèi)，可能導(dǎo)致妨礙或者甚至完全消除內(nèi)源基因的作用的突變。因此，使用DNA的基因治療可導(dǎo)致對(duì)治療的宿主中關(guān)鍵遺傳功能的損害，例如，消除或者有害地降低關(guān)鍵酶的產(chǎn)生或者中斷調(diào)解細(xì)胞生長(zhǎng)的關(guān)鍵基因，這導(dǎo)致未調(diào)節(jié)或癌性細(xì)胞增殖。此外，使用常見的基于DNA的基因治療，所需基因產(chǎn)品的有效表達(dá)是必須的，從而包含強(qiáng)的啟動(dòng)子序列，這也可導(dǎo)致在細(xì)胞中常見基因表達(dá)調(diào)節(jié)的非期望改變。也可能，基于DNA的遺傳物質(zhì)導(dǎo)致引入非所需抗-DNA抗體，反過來，這可觸發(fā)可能的致命免疫應(yīng)答。使用病毒載體的基因治療途徑也能夠?qū)е虏焕拿庖邞?yīng)答。在一些情況下，病毒載體甚至可整合至宿主基因組內(nèi)。此外，制備臨床級(jí)別病毒載體也昂貴和耗時(shí)。使用病毒載體對(duì)引入的遺傳物質(zhì)的靶向遞送也難于控制。因此，盡管已經(jīng)評(píng)估使用病毒載體遞送分泌的蛋白的基于DNA的基因治療(美國(guó)專利No.6,066,626；US2004/0110709)，但由于這些各種原因這些途徑受到限制。

遞送編碼分泌的蛋白的核酸的這些現(xiàn)有途徑的另一障礙是最終產(chǎn)生的蛋白的水平。在血液中難以達(dá)到所需蛋白的顯著水平，并且量維持時(shí)間不長(zhǎng)。例如，通過核酸遞送產(chǎn)生的蛋白量未達(dá)到正常生理水平。參見，例如，US2004/0110709。

與DNA相比，使用RNA作為基因治療劑則基本上更加安全，因?yàn)椋?1)RNA未涉及穩(wěn)定地整合至轉(zhuǎn)染的細(xì)胞的基因組內(nèi)，從而消除以下憂慮：引入的遺傳物質(zhì)破壞必需基因的正常功能，或者導(dǎo)致引起有害或致癌作用的突變；(2)有效地翻譯編碼的蛋白無需外源性啟動(dòng)子序列，從而也避免有害的副作用；(3)與質(zhì)粒DNA(pDNA)相比，信使RNA(mRNA)缺乏免疫CpG基序，從而不會(huì)產(chǎn)生抗-RNA抗體；以及(4)由于RNA的相對(duì)較短的半衰期，由于基于mRNA的基因治療導(dǎo)致的任何有害作用具有有限的持續(xù)時(shí)間。此外，mRNA不需要進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi)執(zhí)行它的功能，但DNA必須克服該主要障礙。