[發(fā)明專利]一種新型冠狀病毒Mpro

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010552272.8
• 申請日: 2020-06-17
• 公開（公告）號: CN111896504A
• 公開（公告）日: 2020-11-06
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李冰清;岳盈盈;宋楠楠;馬玥
• 申請（專利權(quán)）人: 山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64;C12Q1/37
• 代理公司: 北京德崇智捷知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11467
• 代理人: 申星宇

1.一種新型冠狀病毒M^pro蛋白酶靶點(diǎn)藥物篩選試劑盒，其特征在于，包括M^pro蛋白、熒光多肽底物以及反應(yīng)試劑緩沖液，多肽底物兩端分別含有酶解熒光標(biāo)記，所述多肽底物的序列為SEQ ID NO:1所示的多肽底物。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種新型冠狀病毒M^pro蛋白酶靶點(diǎn)藥物篩選試劑盒，其特征在于，所述多肽底物的N端連接標(biāo)記基團(tuán)，C端連接熒光淬滅基團(tuán)。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種新型冠狀病毒M^pro蛋白酶靶點(diǎn)藥物篩選試劑盒，其特征在于，所述酶解熒光標(biāo)記的標(biāo)記基團(tuán)和熒光淬滅基團(tuán)可以為Dabcyl和Edans、Mca和lys(dnp)、Abz和Tyr(3-NO2)、6－TMARA和FITC中的一種。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種新型冠狀病毒M^pro蛋白酶靶點(diǎn)藥物篩選試劑盒，其特征在于，所述試劑盒的酶活反應(yīng)20μl反應(yīng)體系如下：

M^pro蛋白2μl

多肽底物5μl

反應(yīng)buffer 13μl 。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種新型冠狀病毒M^pro蛋白酶靶點(diǎn)藥物篩選試劑盒在篩選靶點(diǎn)藥物檢測其抑制活性的應(yīng)用。

6.一種靶點(diǎn)藥物篩選酶活測定定量分析的方法，其特征在于，M^pro蛋白通過酶活反應(yīng)水解所述多肽底物使得所述多肽底物的酶解熒光標(biāo)記的基團(tuán)分離后在336nm波長光激發(fā)后檢測顯色。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種新型冠狀病毒M^pro蛋白酶靶點(diǎn)藥物篩選試劑盒，其特征在于，通過計算M^pro的米氏常數(shù)Km值及催化效率Kcat值，定量判定靶標(biāo)化合物的抑制能力。