[發明專利]一種檢測蛋白含量的氨基黑染色液、試劑盒及方法

在審

• 申請號: 202010551793.1
• 申請日: 2020-06-17
• 公開（公告）號: CN111537316A
• 公開（公告）日: 2020-08-14
• 發明（設計）人: 陳洪棟
• 申請（專利權）人: 陜西健吉躍生物科技有限公司
• 主分類號: G01N1/30
• 分類號: G01N1/30;G01N1/34;G01N21/78;G01N1/44;G01N1/28;G01N1/38;G01N21/31
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1.一種檢測蛋白含量的氨基黑染色液，其特征在于，每升所述氨基黑染色液包括以下組分：甲醇200~400mL、冰醋酸50~150mL、氨基黑0.05~0.15g，余量為水。

2.根據權利要求1所述的一種檢測蛋白含量的氨基黑染色液，其特征在于，每升所述氨基黑染色液包括以下組分：甲醇250~350mL、冰醋酸80~120mL、氨基黑0.08~0.12g，余量為水。

3.一種檢測蛋白含量的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括如權利要求1或2所述的氨基黑染色液。

4.根據權利要求3所述的一種檢測蛋白含量的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括漂洗液、洗脫液以及若干組不同濃度的標準蛋白溶液。

5.根據權利要求4所述的一種檢測蛋白含量的試劑盒，其特征在于，所述標準蛋白溶液為標準牛血清白蛋白溶液。

6.根據權利要求4所述的一種檢測蛋白含量的試劑盒，其特征在于，所述漂洗液為甲醇水溶液，其體積濃度為40%~60%。

7.根據權利要求4所述的一種檢測蛋白含量的試劑盒，其特征在于，所述洗脫液為氫氧化鈉溶液，其摩爾濃度為0.5~1.5mol/L。

8.一種檢測蛋白含量的方法，其特征在于，所述方法是使用如權利要求4~7中任一項所述試劑盒進行的，其包括以下步驟：

分別對若干組不同濃度的所述標準蛋白溶液進行檢測，并繪制標準曲線；

將待測蛋白樣品進行變性處理后，再置于載體上，并用所述漂洗液進行漂洗；

待漂洗后的待測蛋白樣品的顏色消失后，再將載體置于所述氨基黑染色液中進行染色；

待染色后的待測蛋白樣品的顏色穩定后，再將載體置于所述漂洗液進行漂洗；然后，將載體上的待測蛋白樣品取出，并置于所述洗脫液中進行震蕩處理，得到測試液；

對測試液進行吸光度測試，并根據上述標準曲線計算得到待測蛋白樣品中蛋白的濃度值。

9.根據權利要求8所述的一種檢測蛋白含量的方法，其特征在于，所述步驟中，變性處理的溫度為93~97℃。

10.根據權利要求8所述的一種檢測蛋白含量的方法，其特征在于，所述載體為硝酸纖維素膜。