[發(fā)明專利]一種即用型葉酸檢測載體及其制備方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 202010543809.4 | 申請日： | 2020-06-15 |
| 公開（公告）號： | CN111705102B | 公開（公告）日： | 2023-09-12 |
| 發(fā)明（設計）人： | 齊延林;王舒樂;張恒;胡云平 | 申請（專利權(quán)）人： | 深圳市瑞賽生物技術有限公司 |
| 主分類號： | C12Q1/02 | 分類號： | C12Q1/02;C12N1/04;C12R1/225;C12R1/01 |
| 代理公司： | 深圳中圳知識產(chǎn)權(quán)代理事務所(普通合伙) 44768 | 代理人： | 廖苑濱 |
| 地址： | 518101 廣東省深圳市寶安*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 即用型 葉酸 檢測 載體 及其 制備 方法 | ||
1.一種即用型葉酸檢測載體的制備方法，其特征在于，其包括以下步驟：
（1）將葉酸測試培養(yǎng)基與塑形填充劑混合，裝入載體容器后凍干，獲得葉酸測試培養(yǎng)基固定層；
（2）將抗氧化阻隔液與塑形填充劑混合，裝入載體容器以覆蓋在已凍干的葉酸測試培養(yǎng)基固定層上，凍干獲得位于葉酸測試培養(yǎng)基固定層上的抗氧化阻隔層；
（3）將已活化的葉酸測試菌種分散于凝膠保護劑中，取菌懸液黏附于載體容器中并固定化干燥，即得即用型葉酸檢測載體；所述葉酸測試菌種包含鼠李糖乳酸桿菌、海氏腸球菌和糞鏈球菌的至少一種；
步驟（1）（2）中，所述塑形填充劑組分包括：1~5wt%右旋糖酐5000~7500、1~6wt%聚乙二醇4000~8000及0.05~2wt%α-環(huán)狀糊精，余量為水；
步驟（2）中，所述抗氧化阻隔液組分包括：1~12wt%聚乙烯吡咯烷酮10k~40k、0.4~2wt%維生素E、0.5~2wt%抗壞血酸鈉及0.01~0.1wt%谷胱甘肽，余量為水。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的即用型葉酸檢測載體的制備方法，其特征在于，步驟（1）所述的葉酸測試培養(yǎng)基與塑形填充劑混合體積比為（2~6）：1。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的即用型葉酸檢測載體的制備方法，其特征在于，步驟（2）所述的抗氧化阻隔液與塑形填充劑混合體積比為（2~4）：1。
4.?根據(jù)權(quán)利要求1所述的即用型葉酸檢測載體的制備方法，其特征在于，步驟（3）所述凝膠保護劑組分包括：1~4wt%甘露醇、0.01~1?M氯化鎂、0.1~1wt%牛奶酪蛋白、0.02~0.2wt%瓜爾膠/卡拉膠/黃原膠，余量為水。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的即用型葉酸檢測載體的制備方法，其特征在于，步驟（3）所述已活化的葉酸測試菌種是將葉酸測試菌種菌粉或菌珠加入0.4~5mL葉酸測試培養(yǎng)基中，再加入0.1~0.5ng/mL葉酸標準溶液0.4~5mL進行活化獲得。
6.?根據(jù)權(quán)利要求1所述的即用型葉酸檢測載體的制備方法，其特征在于，步驟（3）所述固定化干燥程序為：預凍階段為溫度控制在-80℃~-65℃，保持1~2.5h；一次升華干燥階段為溫度控制在-65℃~-48℃，將真空度降至0.12~0.32mbar，達到最終真空度時間為8~16h；二次升華干燥階段為溫度控制在0℃，真空度控制在0.12~0.32mbar，達到最終溫度時間為8~14h；解析干燥階段最終溫度為25℃，真空度控制在0.010~0.020mbar，達到最終溫度時間為?8~12h。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的即用型葉酸檢測載體的制備方法，其特征在于，所述載體容器為微孔板或離心管或培養(yǎng)試管。
8.一種即用型葉酸檢測載體，其特征在于，其通過如權(quán)利要求1至7任一所述的即用型葉酸檢測載體的制備方法制得。
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