[發明專利]一種多糖季銨鹽在遞送核酸和蛋白質上的應用

有效

• 申請號: 202010542508.X
• 申請日: 2020-06-15
• 公開（公告）號: CN111658784B
• 公開（公告）日: 2022-09-09
• 發明（設計）人: 徐福建;胡楊;范亞倩;邵玫瑜
• 申請（專利權）人: 北京化工大學
• 主分類號: A61K47/61
• 分類號: A61K47/61;A61K48/00;A61K31/7088;A61K38/00;C07D303/36;C07D301/27;C07C213/04;C07C215/40;C08B11/20;C08B35/00;C08B37/02;C08B37/08;C08B37/16
• 代理公司: 重慶信航知識產權代理有限公司 50218
• 代理人: 孫章虎

1.一種多糖季銨鹽在制備遞送核酸和蛋白質藥物的載體材料上的應用，其特征在于，所述的多糖季銨鹽可以用于遞送核酸和蛋白質，其制備步驟為：

1)配制伯胺多糖的水溶液；所述的伯胺多糖平均分子量為4000～30000；

2)加入短烷基碳原子數為X的環氧基短烷基鏈季銨鹽或氯羥丙基短烷基季銨鹽進行反應進行反應，反應溫度為25～90℃，反應時間為6～72小時，所述的X＝1～5；

3)沉淀、洗滌、干燥，得到仲胺型-多糖季銨鹽；

步驟2)所述的環氧基短烷基鏈季銨鹽或氯羥丙基短烷基季銨鹽與步驟1)所述的伯胺多糖投料質量比為0.1～3:1；

步驟1)所述的伯胺多糖為自身帶伯胺的甲殼素、殼聚糖或殼聚糖酸鹽，所述的殼聚糖酸鹽為殼聚糖鹽酸鹽、殼聚糖醋酸鹽、殼聚糖乳酸鹽或殼聚糖檸檬酸鹽，所述的水溶液為純水溶液或純水與鹽酸、醋酸、乳酸、檸檬酸中一種酸的混合溶液；

步驟1)所述的伯胺多糖為自身不帶伯胺的多糖經伯胺小分子偶聯反應后得到的伯胺多糖；所述的自身不帶伯胺的多糖為葡聚糖、環糊精、普魯蘭、羥丙基纖維素、羥乙基纖維素、羥乙基淀粉、直鏈淀粉或支鏈淀粉。

2.根據權利要求1所述的一種多糖季銨鹽在制備遞送核酸和蛋白質藥物的載體材料上的應用，其特征在于，步驟1)所述的伯胺多糖制備方法為：將自身不帶伯胺的多糖溶于溶劑，加入可激活多糖上的羥基的催化劑和伯胺基試劑，在25～70℃下反應5～72小時，去離子水透析，冷凍干燥后得到伯胺多糖，所述催化劑與多糖上的單糖單元的質量比為0.05～3:1，所述伯胺基試劑與催化劑的質量比為0.2～30:1。

3.根據權利要求1所述的一種多糖季銨鹽在制備遞送核酸和蛋白質藥物的載體材料上的應用，其特征在于，步驟1)所述的伯胺多糖平均分子量為7000～25000。

4.根據權利要求2所述的一種多糖季銨鹽在制備遞送核酸和蛋白質藥物的載體材料上的應用，其特征在于，所述的溶劑為水、二甲基亞砜、二氯甲烷、N,N-二甲基甲酰胺的一種或多種混合溶劑；所述催化劑根據溶劑選擇，水對應催化劑氫氧化鈉，二甲基亞砜對應催化劑N,N-羰基二咪唑，二氯甲烷或N,N-二甲基甲酰胺對應催化劑為對硝基氯甲酸苯酯；所述的伯胺基試劑為2-氯乙胺鹽酸鹽、3-氯丙胺鹽酸鹽、4-氯丁胺鹽酸鹽、乙二胺、丙二胺、丁二胺、戊二胺、二亞乙基三胺，2,2'-二氨基-N-甲基二乙胺中的一種或多種。

5.根據權利要求1所述的一種多糖季銨鹽在制備遞送核酸和蛋白質藥物的載體材料上的應用，其特征在于，步驟2)所述的環氧基短烷基鏈季銨鹽或氯羥丙基短烷基季銨鹽和步驟1)所述的伯胺多糖的投料質量比為0.2～1.5:1。

6.根據權利要求1所述的一種多糖季銨鹽在制備遞送核酸和蛋白質藥物的載體材料上的應用，其特征在于，步驟2)所述的環氧基短烷基鏈季銨鹽為2,3-環氧丙基三甲基氯化銨或由環氧氯丙烷和N,N-二甲基X胺的反應得到的產物，所述的氯羥丙基短烷基季銨鹽為3-氯-2-羥丙基三甲基氯化銨或由環氧氯丙烷和N,N-二甲基X胺在鹽酸存在下的反應產物，所述的X為乙、丙、丁或戊。

7.根據權利要求1所述的一種多糖季銨鹽在制備遞送核酸和蛋白質藥物的載體材料上的應用，其特征在于，步驟3)之后將仲胺型-多糖季銨鹽與核酸遞送增強分子進行接枝反應，所述的核酸遞送增強分子為精氨酸、組氨酸、咪唑、苯硼酸、葉酸、膽酸、膽固醇酸的一種或多種。

8.根據權利要求1所述的一種多糖季銨鹽在制備遞送核酸和蛋白質藥物的載體材料上的應用，其特征在于，將所述材料與所述核酸和蛋白質按照質量比0.5～100組成復合體，進行遞送；所述的核酸為包括質粒DNA、微環DNA、基因組DNA、小干擾RNA(siRNA)、信使RNA(mRNA)、微小RNA(miRNA)、雙鏈RNA(dsRNA)、小發夾RNA(shRNA)在內的脫氧核糖核酸或核糖核酸；所述的蛋白質為包括牛血清白蛋白、溶菌酶、綠色熒光蛋白、p53抑瘤蛋白、堿性磷酸酶、胞嘧啶脫氨酶、核酸酶、胸苷激酶、紫外光響應蛋白、紅外光響應蛋白、核糖核蛋白水溶液中呈負電性蛋白質。