[發明專利]一種多糖季銨鹽在遞送核酸和蛋白質上的應用

有效

• 申請號: 202010542508.X
• 申請日: 2020-06-15
• 公開（公告）號: CN111658784B
• 公開（公告）日: 2022-09-09
• 發明（設計）人: 徐福建;胡楊;范亞倩;邵玫瑜
• 申請（專利權）人: 北京化工大學
• 主分類號: A61K47/61
• 分類號: A61K47/61;A61K48/00;A61K31/7088;A61K38/00;C07D303/36;C07D301/27;C07C213/04;C07C215/40;C08B11/20;C08B35/00;C08B37/02;C08B37/08;C08B37/16
• 代理公司: 重慶信航知識產權代理有限公司 50218
• 代理人: 孫章虎

本發明公開了一種多糖季銨鹽在遞送核酸和蛋白質上的應用，所述的多糖季銨鹽可以用于遞送核酸和蛋白質，其制備步驟為：1)配制伯胺多糖的水溶液；所述的伯胺多糖平均分子量為4000～30000；2)加入短烷基碳原子數為X的環氧基短烷基鏈季銨鹽或氯羥丙基短烷基季銨鹽進行反應進行反應，反應溫度為25～90℃，反應時間為6～72小時，所述的X＝1～5，3)沉淀、洗滌、干燥，得到仲胺型?多糖季銨鹽；步驟2)所述的環氧基短烷基鏈季銨鹽或氯羥丙基短烷基季銨鹽與步驟1)所述的伯胺多糖投料質量比為0.1～3:1。本發明的多糖季銨鹽遞送載體用于核酸和蛋白質的遞送，遞送效率和生物相容性將遠優于現有載體。

技術領域

本發明屬于遞送載體領域，涉及一種多糖季銨鹽在遞送核酸和蛋白質上的應用。

背景技術

核酸、蛋白質類生物大分子的胞內遞送對疾病治療和生物醫學研究具有重要作用，目前陽離子聚合物遞送載體有聚乙烯亞胺(PEI)和PAMAM等(International Journalof Pharmaceutics,2014,465(1-2):112-119.)，但是一般毒性大，遞送效率有限。本課題團隊曾利用聚甲基丙烯酸縮水甘油酯(PGMA)與乙醇胺(EA)的開環反應，制備了鏈節中同時含有仲胺基團和羥基的新型陽離子聚合物PGEA，相比于PEI、PAMAM等具有更高的遞送效率和低毒性(Biomacromolecules,2010,11(6):1437-1442；ZL201210127021.0)。有多糖基遞送載體的一些文獻報導(Biomaterials,2012,33(6):1873-1883；ACS Applied MaterialsInterfaces,2016,8(47):32146；Advanced Functional Materials,2019,29(11):1807104.1-1807104.12等)，大多是陽離子聚合物接枝多糖載體，能夠結合陽離子聚合物的負電性絡合能力(絡合核酸，結合蛋白質)和多糖的生物相容性，有可能制備出遞送效率較高和毒性較低的載體。但是由于側鏈接枝的仍是較大平均分子量的陽離子聚合物，此類陽離子聚合物接枝多糖載體的毒性仍然不容忽視，限制了進一步提高遞送效率、降低毒性及臨床應用的可能。因此，開發新型結構的功能基團并引入多糖結構以構建新型高效率、低毒載體很有必要。

發明內容

有鑒于此，本發明提供一種多糖季銨鹽在遞送核酸和蛋白質上的應用，本發明具體提供了如下的技術方案：

1、一種多糖季銨鹽在遞送核酸和蛋白質上的應用，所述的多糖季銨鹽遞送可以用于遞送核酸和蛋白質，其制備步驟為：

1)配制伯胺多糖的水溶液；所述的伯胺多糖平均分子量為4000～30000；

2)加入短烷基碳原子數為X的環氧基短烷基鏈季銨鹽或氯羥丙基短烷基季銨鹽進行反應進行反應，反應溫度為25～90℃，反應時間為6～72小時，所述的X＝1～5，

3)沉淀、洗滌、干燥，得到仲胺型-多糖季銨鹽；

步驟2)所述的環氧基短烷基鏈季銨鹽或氯羥丙基短烷基季銨鹽與步驟1)所述的伯胺多糖投料質量比為0.1～3:1。

進一步，步驟1)所述的伯胺多糖為自身帶伯胺的甲殼素、殼聚糖或殼聚糖酸鹽，所述的殼聚糖酸鹽為殼聚糖鹽酸鹽、殼聚糖醋酸鹽、殼聚糖乳酸鹽或殼聚糖檸檬酸鹽，所述的水溶液為純水溶液或純水與鹽酸、醋酸、乳酸、檸檬酸中一種酸的混合溶液。

進一步，步驟1)所述的伯胺多糖為自身不帶伯胺的多糖經伯胺小分子偶聯反應后得到的伯胺多糖；所述的自身不帶伯胺的多糖為葡聚糖、環糊精、普魯蘭、羥丙基纖維素、羥乙基纖維素、羥乙基淀粉、直鏈淀粉或支鏈淀粉。

進一步，步驟1)所述的伯胺多糖制備方法為：將自身不帶伯胺的多糖溶于溶劑，加入可激活多糖上的羥基的催化劑和伯胺基試劑，在25～70℃下反應5～72小時，去離子水透析，冷凍干燥后得到伯胺多糖，所述催化劑與多糖上的單糖單元的質量比為0.05～3:1，所述伯胺基試劑與催化劑的質量比為0.2～30:1。