[發明專利]尿液中梅毒螺旋體抗體檢測試劑盒、制備方法及使用方法

在審

• 申請號: 202010540443.5
• 申請日: 2020-06-15
• 公開（公告）號: CN111638331A
• 公開（公告）日: 2020-09-08
• 發明（設計）人: 詹利紅;申慶紅;楊衛平;李美霞;張培蕾
• 申請（專利權）人: 鄭州方欣生物科技有限責任公司
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;G01N33/558;G01N33/58
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.尿液中梅毒螺旋體抗體檢測試劑盒，其特征在于：包括檢測試紙條，所述檢測試紙條由在PVC板上固定的樣品墊、結合墊、包被檢測線和質控線的硝酸纖維素膜、吸水紙組成，結合墊上包被有金標SPA，硝酸纖維素膜檢測線上包被有梅毒螺旋體重組抗原，質控線上包被有兔抗SPA。

2.如權利要求1所述的尿液中梅毒螺旋體抗體檢測試劑盒的制備方法，其特征在于：包括以下步驟；

1）膠體金的制備：用氯金酸溶液和檸檬酸三鈉溶液制備小顆粒膠體金溶液；

2）重組蛋白A標記：將重組蛋白A加入小顆粒膠體金溶液中，制備重組蛋白A-膠體金標記物；

3）結合墊的制備：將重組蛋白A-膠體金標記物浸泡玻璃纖維，制得結合墊；

4）TP重組抗原包被：在硝酸纖維素膜上分別包被TP重組抗原構成的檢測線和兔抗SPA構成的質控線；

5）試紙的制備：將樣品墊、結合墊、硝酸纖維素膜和吸水紙依次固定在PVC底板上，即得。

3. 根據權利要求2所述的尿液中梅毒螺旋體抗體檢測試劑盒的制備方法，其特征在于：在結合墊的制備時，以氯金酸-檸檬酸鈉還原法制備25nm膠體金溶液，制備完成后取100ml，用0.2M K₂CO₃調PH至8.0，按15ug/ml標記濃度加入SPA，室溫攪拌30min，按0.5%終濃度加入10%BSA，室溫攪拌30min，11000rpm轉速于離心機中離心50分鐘后，棄上清，加入膠體金復溶液定容至100ml，按照30cm²/ml比例將溶液均勻地鋪在玻璃纖維上，干燥制成膠體金墊。

4. 根據權利要求2所述的尿液中梅毒螺旋體抗體檢測試劑盒的制備方法，其特征在于：在硝酸纖維素膜的包被時，將梅毒螺旋體重組抗原及兔抗SPA分別溶解在包被液中，配制成0.8mg/ml 質控線、檢測線包被液，用劃膜儀在硝酸纖維素膜上以1ul/cm參數進行劃線，包被質控線、檢測線。

5.根據權利要求4所述的尿液中梅毒螺旋體抗體檢測試劑盒的制備方法，其特征在于：包被好的硝酸纖維素膜在35℃±3℃，30%±3%濕度環境下干燥6-12小時。

6. 根據權利要求2所述的尿液中梅毒螺旋體抗體檢測試劑盒的制備方法，其特征在于：樣品墊的制備：將玻璃纖維或無紡布中的一種浸泡于0.05M PH=8.0的Tris-Hcl緩沖液中1小時，取出室溫晾干，密封備用。

7.根據權利要求2所述的尿液中梅毒螺旋體抗體檢測試劑盒的制備方法，其特征在于：試紙條的組裝時，將制備好的硝酸纖維素膜、膠體金墊、樣品墊及吸水紙分別粘附在PVC大板上，粘貼不干膠保護金墊，切條后包裝。

8.如權利要求1所述的尿液中梅毒螺旋體抗體檢測試劑盒的使用方法，其特征在于：使用濃縮介質，利用其理化特性對尿液樣本進行濃縮，然后使用檢測試紙條對尿液樣本檢測。