[發明專利]一種用于檢測未知樣品年齡的引物組、試劑盒其使用方法

在審

• 申請號: 202010538742.5
• 申請日: 2020-06-13
• 公開（公告）號: CN111593130A
• 公開（公告）日: 2020-08-28
• 發明（設計）人: 邵武;董進法;林春美;梁耀極;謝璐;賴宏祉
• 申請（專利權）人: 遼寧省公安廳;遼寧佰昊生物科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/6888
• 分類號: C12Q1/6888;C12N15/11
• 代理公司: 北京盛凡智榮知識產權代理有限公司 11616
• 代理人: 戴秀秀

1.一種用于檢測未知樣品年齡的引物組，其特征在于，包括以4個位點作為甲基化標志物對應的8組引物序列，所述甲基化標志物分別為：ITGA2B、KLF14、RASSF5、PDE4C，所述8組引物序列分別為ITGA2B-F、ITGA2B-R、KLF14-F、KLF14-R、RASSF5-F、RASSF5-R、PDE4C-F、PDE4C-R，所述8組引物序列具體表示如下：

ITGA2B-F(SEQ ID NO.1)：ACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCTTAAGATTTGATTTTGGTTGGG；

ITGA2B-R(SEQ ID NO.2)：GTGACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATCTATCACATACTACACATTAAACTC；

KLF14-F(SEQ ID NO.3)：ACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCTTGGTAGAGATTTGTTTTGGTTTGT；

KLF14-R(SEQ ID NO.4)：GTGACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATCTCTTTCTAAAACTCCACAAAACACCC；

RASSF5-F(SEQ ID NO.5)：ACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCTGTAGTATTGAGTGTGTAGTGTGTG；

RASSF5-R(SEQ ID NO.6)：GTGACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATCTCCTAACACACACATCCTCCAAC；

PDE4C-F(SEQ ID NO.7)：ACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCTGAATAGAAGTGTTGTTGGATGTGG；

PDE4C-R(SEQ ID NO.8)：GTGACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATCTCACTCCTCAACACCCACTCAC。

2.根據權利要求1所述的一種用于檢測未知樣品年齡的引物組，其特征在于：所述引物組中的SEQ ID NO.1-SEQ ID NO.8所述單鏈DNA分子的終濃度均獨立地為0.1-0.15umol/L。

3.權利要求1所述的用于檢測未知樣品年齡的引物組在對制備檢測試劑中的應用。

4.一種用于檢測未知樣品年齡的試劑盒，其特征在于：包括含有權利要求1所述的引物組以及PCR反應體系，所述PCR反應體系包括聚合酶、反應緩沖液和dNTP。

5.一種用于檢測未知樣品年齡的試劑盒的使用方法，其特征在于：

用權利要求1所述的引物組對待測樣品進行擴增，檢測擴增產物中甲基化情況，進而確定樣品年齡。