[發明專利]一種德國鳶尾胚性愈傷組織低溫保存的方法有效
| 申請號： | 202010536083.1 | 申請日： | 2020-06-12 |
| 公開（公告）號： | CN111887154B | 公開（公告）日： | 2022-09-30 |
| 發明（設計）人： | 張永俠;原海燕;劉清泉;王銀杰;楊永恒;張婷;徐曉洋;孫玉明;黃蘇珍 | 申請（專利權）人： | 江蘇省中國科學院植物研究所 |
| 主分類號： | A01H4/00 | 分類號： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 210014 江*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 德國 鳶尾 胚性愈傷 組織 低溫 保存 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種德國鳶尾胚性愈傷組織低溫保存的方法，其特征在于，該方法的步驟如下：
(1)胚性愈傷組織的準備：
取繼代2～3次的德國鳶尾胚性愈傷組織，將其切成2mm的小塊備用；
(2)包埋
將步驟(1)中的胚性愈傷放入包埋劑MS+2～4wt％海藻酸鈉+3wt％蔗糖中，pH值為5.8～5.9，混合均勻；用吸管吸取胚性愈傷，垂直滴到2～4％CaCl2溶液中進行離子交換，10～15min，然后用無菌水漂洗2次，終止反應，撈起晾干后得到德國鳶尾胚性愈傷的包埋小球；
(3)低溫保存
將步驟(2)得到的包埋小球，置于無菌三角瓶，密封后于4℃黑暗條件下保存6～8個月；
(4)復蘇：
取步驟(3)中低溫保存的胚性愈傷組織小球接種到最佳胚性愈傷組織誘導培養基1.5mg/L 2,4-D、0.2mg/L 6-BA、30g/L蔗糖和6g/L瓊脂粉的MS培養基上，pH值為5.8～5.9，置于25℃黑暗條件下過渡培養一周后，光下常規培養。
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