[發明專利]一種基于pH和氧化還原雙重響應的抗肝癌藥物納米粒子的制備方法

在審

• 申請號: 202010533825.5
• 申請日: 2020-06-12
• 公開（公告）號: CN111568879A
• 公開（公告）日: 2020-08-25
• 發明（設計）人: 胡蔣寧;徐玉;王新闖
• 申請（專利權）人: 大連工業大學
• 主分類號: A61K9/51
• 分類號: A61K9/51;A61K47/36;A61K47/22;A61K31/704;A61P35/00
• 代理公司: 大連格智知識產權代理有限公司 21238
• 代理人: 張蕊;劉琦

本發明公開了一種基于pH和氧化還原雙重響應的抗肝癌藥物納米粒子的制備方法。該納米粒子的制備包括以下步驟：首先，采用尿刊酸和α?硫辛酸通過酯鍵與多糖進行接枝以獲得具有pH和氧化還原雙重響應的聚合物LA?URPA；再通過反溶劑法實現抗肝癌藥物納米粒子的自組裝，從而得到了具有pH和氧化還原雙重響應的抗肝癌藥物納米粒子。本發明制備的抗肝癌藥物納米粒子不僅具有良好的穩定性和生物相容性，還具有pH和氧化還原雙重響應性，它能實現藥物的快速釋放，從而有效殺死腫瘤細胞。此外，ROS介導的線粒體途徑參與了抗肝癌藥物納米粒子誘導的細胞凋亡。本發明對于有效治療肝癌提供了一定的理論依據。

技術領域

本發明屬于納米材料的制備技術領域，更具體地說，涉及一種基于pH和氧化還原雙重響應的抗肝癌藥物納米粒子的制備方法。

背景技術

據報道，肝細胞癌(HCC)是世界上最惡性的癌癥之一，也是癌癥死亡的第三大主要原因。到目前為止，傳統的治療方法主要是手術切除，放療和化療。手術切除被認為是治療HCC的最佳方法，但腫瘤細胞易于轉移并侵襲其他組織，具有較高的復發風險。此外，已證明放療和化學療法會殺死輻射范圍內的所有細胞，包括正常細胞，這些細胞選擇性差且副作用嚴重，并降低了患者的生活質量。因此，探索治療肝癌的有效方法非常迫切，已引起研究人員的廣泛關注。

目前，人參皂苷Rh₂，紫杉醇，DOX等藥物，對多種實體瘤具有顯著的抗腫瘤活性，這些實體瘤包括肝癌，肺癌，卵巢癌，乳腺癌，結腸癌等，可有效抑制腫瘤細胞凋亡。然而，已發現這些藥物存在諸多缺陷。直接使用這些藥物時，不僅口服生物利用度低，水溶性較低，化學穩定性較差，而且缺乏靶向腫瘤的能力，會殺死正常細胞并損害人體，具有嚴重的副作用，限制了其在臨床試驗中的應用。

有趣的是，納米藥物遞送系統的發展為改善抗腫瘤藥物的缺陷提供了新的策略。與傳統療法相比，該系統具有更高的溶解度，化學穩定性和生物利用度，有效的靶向性，更長的周期時間和低毒性。然而，臨床試驗的結果表明，傳統的聚合物納米載體可能無法在病理變化中實現藥物的程序性釋放，從而導致細胞的多重耐藥性和功效降低。同時，由于簡單的物理包封，抗癌藥物在全身循環中很容易從載體中漏出，從而導致嚴重的副作用。此外，由于較差的水溶性，疏水性藥物在納米制劑中的包封率非常低，這也嚴重限制了其應用。目前，納米藥物遞送系統通常可以響應生理刺激選擇性地釋放藥物，引起了研究人員的注意。當響應刺激在細胞內環境中時，納米藥物載體到達腫瘤細胞并在環境刺激下迅速釋放藥物，這不僅減少了副作用，而且還提高了藥物的功效。

發明內容

本發明的目的在于提供一種基于pH和氧化還原雙重響應的抗肝癌藥物納米粒子的制備方法，該方法重復性好，操作性強。

本發明為實現上述目的所采用的的技術方案是：首先合成聚合物URPA和LA-URPA，然后并使用傅里葉紅外光譜(FT-IR)，1H核磁共振光譜(1H NMR)，高效凝膠滲透色譜(HPGPC)，X射線光電子能譜(EDS)對聚合物的結構進行表征。然后以此為載體制備得到Rh₂納米粒子，最后采用動態光散射(DLS)，透射電子顯微鏡(TEM)，掃描電子顯微鏡(SEM)，和X射線衍射(XRD)對納米粒子的結構進行表征。判斷其是否成功合成。然后采用反溶劑法制備LA-URPA納米粒子。最后對納米粒子的結構進行分析。

一種基于pH和氧化還原雙重響應的抗肝癌藥物納米粒子的制備方法，包括以下步驟：

S1、合成聚合物URPA

S11、將尿刊酸溶解在干燥的二甲基亞砜(DMSO)中，并加入二環己基碳二亞胺(DCC)、4-二甲氨基吡啶(DMAP)，室溫下避光攪拌1～3h進行活化，使混合物反應，得尿刊酸溶液；其中，所述尿刊酸、DCC、DMAP的重量比為5:10:12～5:30:12；所述尿刊酸和DMSO的重量體積比為1:20～1:50g/mL；