[發明專利]一種基于釩酸銀/釩酸銦的電化學發光傳感器制備方法及應用

有效

• 申請號: 202010532444.5
• 申請日: 2020-06-12
• 公開（公告）號: CN111830100B
• 公開（公告）日: 2022-12-20
• 發明（設計）人: 吳丹;薛經緯;魏琴;趙磊;馬洪敏
• 申請（專利權）人: 濟南大學
• 主分類號: G01N27/30
• 分類號: G01N27/30;G01N27/327;G01N27/48;G01N21/76
• 代理公司: 濟南譽豐專利代理事務所(普通合伙企業) 37240
• 代理人: 趙鳳

1.一種基于釩酸銀/釩酸銦納米復合材料的電化學發光傳感器制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）依次用1.0、0.3、0.05 μm的氧化鋁粉末對玻碳電極進行拋光，在超純水和乙醇中超聲清洗，氮氣吹干；

（2）在處理好的電極表面滴加6 μL、濃度為0.5~5 mg/mL的復合發光體作為傳感基底材料，4 °C下晾干成膜；

（3）加入3~8 mM巰基乙酸在4 °C下浸泡5 h后轉入EDC/NHS混合體系中浸泡30 min來活化羧基；

（4）繼續在4 °C條件下浸泡濃度為5~15 μg/mL的原降鈣素抗體1 h，用pH 7.4的磷酸鹽緩沖溶液洗凈電極表面，4°C下晾干；

（5）在質量濃度為1~3%的牛血清白蛋白中浸泡來封閉非特異性活性位點，用pH 7.4的磷酸鹽緩沖溶液沖洗電極表面，常溫下晾干；

（6）滴加6 μL、濃度為0.0001~50 ng/mL的原降鈣素抗原，在室溫下孵化1 h后，用pH7.4的磷酸鹽緩沖溶液沖洗電極表面，室溫下晾干；

（7）繼續滴加6 μL、濃度為2~4 mg/mL的氧化銅納米球捕獲抗體孵化液于電極表面，室溫下孵化1 h，用pH 7.4的磷酸鹽緩沖溶液緩慢沖洗電極表面，室溫下晾干；

（8）傳感器構建完畢，進行電致化學發光測試；

所述傳感基底材料復合發光體的制備，包括以下步驟：

（1）釩酸銀/釩酸銦復合納米材料的制備

在60 mL去離子水中加入1.0 mmol的偏釩酸銨，在磁攪拌下得到均相溶液；

隨后，1.0 mmol的硝酸銀加入上述溶液中，并在磁力下攪拌20 min；

這種混合溶液的pH值使用質量濃度為28 %的一水合氨調整到8.0；

獲得的混合物轉移到一個100 mL的聚四氟乙烯內襯的不銹鋼高壓釜中，保存在180 °C下12 h；

之后，生成的黃色沉積物被過濾收集，用去離子水清洗三次；

最終，在60 °C在真空干燥得到產品釩酸銀；

緊接著，將100 mg釩酸銀分散到70 mL去離子水中超聲30 min，然后40 mg一水合硝酸銦加入并持續攪拌30 min獲得均勻的混合物后轉移到一個100 mL的聚四氟乙烯內襯的不銹鋼高壓釜中， 在140 °C下保存8 h；

冷卻后，離心收集的固體產品并在60 °C下真空干燥10 h獲得釩酸銀/釩酸銦復合材料；

（2）四苯乙烯納米簇的制備

采用脫溶法，制備了四苯乙烯納米簇；

將0.5 mg 四苯乙烯粉末溶解于0.5 mL四氫呋喃中，得到均勻無色的四苯乙烯溶液；

隨后，用5 mL去離子水在室溫下超聲分散10 mg 牛血清白蛋白；

然后將0.5 mL 四苯乙烯在超聲下緩慢注入牛血清白蛋白溶液中，室溫攪拌2 h；

最后用水和無水乙醇洗滌后放入真空干燥箱中干燥得到四苯乙烯納米簇粉末；

（3）復合發光體的制備

取2 mg釩酸銀/釩酸銦復合納米材料在1 M的巰基乙酸溶液中浸泡12 h后離心去除上清液并分散在1 mL水中，將步驟（2）中制備的四苯乙烯納米簇溶于1 mL水中，混合兩溶液，保持震蕩8 h，離心洗滌，獲得復合發光體材料的粉末。