[發明專利]一種高靈敏度和特異度的sdLDL-C比色法檢測試劑盒及其制備使用方法

有效

• 申請號: 202010532055.2
• 申請日: 2020-06-11
• 公開（公告）號: CN111551512B
• 公開（公告）日: 2023-07-25
• 發明（設計）人: 芮雙印;符修樂
• 申請（專利權）人: 安徽大千生物工程有限公司
• 主分類號: G01N21/31
• 分類號: G01N21/31;G01N21/78
• 代理公司: 合肥興東知識產權代理有限公司 34148
• 代理人: 李靜

本發明提供了一種高靈敏度和特異度的sdLDL?C比色法檢測試劑盒，包括試劑R1和試劑R2；試劑R1：MOPS緩沖液、PEG?6000、BSA、NaCl、NaNsubgt;3/subgt;、EDTA、過氧化氫酶、膽固醇酯酶、膽固醇氧化酶、TOOS、表面活性劑I，其溶劑為純化水；試劑R2：MOPS緩沖液、PEG?6000、BSA、NaCl、NaNsubgt;3/subgt;、EDTA、4?AAP、過氧化物酶、mPEG?PlD、表面活性劑II，其溶劑為純化水。本發明還提供了一種高靈敏度和特異度的sdLDL?C比色法檢測試劑盒的制備使用方法。本發明試劑盒可用于全自動生化分析儀分析，不僅操作方便，便于臨床應用，還具有較高的特異度與靈敏度。

技術領域

本發明涉及生化測定分析領域，尤其涉及一種高靈敏度和特異度的sdLDL-C比色法檢測試劑盒及其制備使用方法。

背景技術

小而密低密度脂蛋白膽固醇(Small?and?dense?LDL?cholesterol，sdLDL-C)是LDL-C中密度大而顆粒直徑小(直徑為22.0～25.5nm)的一種亞型。近年研究證實，sdLDL-C與動脈粥樣硬化程度、頸動脈內中膜厚度(IMT)、膜島素抵抗和葡萄糖耐受密切相關。大量流行病學研究也顯示，sdLDL-C是冠心病、缺血性腦梗死、糖尿病的獨立危險因素。與僅降低LDL-C水平相比，針對性干預冠心病患者的血漿sdLDL-C水平更能預防和減少不良心血管事件的發生。sdLDL-C水平對冠心病患者發生不良心血管事件的風險具備良好的預測和評估作用，具有代替有創性的冠脈造影檢測的潛力，擁有很大的評估心血管相關疾病的臨床應用前景，值得在臨床實驗室的普遍推廣。

近年來，sdLDL-C濃度的測定方法不斷被報道，測定sdLDL-C濃度的方法有梯度密度超速離心法、梯度凝膠電泳法、化學沉淀法、分子篩色譜分析法、毛細管電泳法、核磁共振光譜法、指標評估法、動態光散射法、均相法等。其中，肝素-鎂化學沉淀離心法是目前測定sdLDL-C的金標準，該方法雖然有較好的特異度和靈敏度，但操作繁瑣，不便大規模臨床應用。現臨床中應用較廣的為均相法，但各公司試劑均存在特異度或/和靈敏度不高的問題，究其原因在于，sdLDL-C與其他含膽固醇組分的分離不充分。據此，目前急需一種操作方便，并且具有高特異度與靈敏度的sdLDL-C檢測新方法。

發明內容

本發明所要解決的技術問題在于提供一種高靈敏度和特異度的sdLDL-C比色法檢測試劑盒及其制備使用方法，采用該試劑盒進行sdLDL-C濃度檢測，不僅操作方便，便于臨床應用，還具有較高的特異度與靈敏度。

本發明采用以下技術方案解決上述技術問題：

一種高靈敏度和特異度的sdLDL-C比色法檢測試劑盒，包括彼此獨立的試劑R1和試劑R2雙液體組分；

所述試劑R1包括的成分及相應含量為：MOPS緩沖液20～80mM，PEG?6000100～200g/L，BSA(牛血清白蛋白)20～30g/L，NaCl?1.8～18g/L，NaN₃(疊氮化鈉)0.2～0.8g/L，EDTA?0.1～1g/L，過氧化氫酶500～900U/L，膽固醇酯酶200～800U/L，膽固醇氧化酶100～1000U/L，TOOS(N-乙基-N-(2-羥基-3-磺丙基)-3-甲基苯胺鈉鹽)10～15mM，表面活性劑I0.05～0.1％，其溶劑為純化水；

所述試劑R2包括的成分及相應含量為：MOPS緩沖液20～80mM，PEG?6000100～200g/L，BSA(牛血清白蛋白)20～30g/L，NaCl?1.8～18g/L，NaN₃(疊氮化鈉)0.2～0.8g/L，EDTA?0.1～1g/L，4-AAP(4-氨基安替比林)0.5～2mM，過氧化物酶10～20U/L，mPEG-PlD?5～15mg/L，表面活性劑II?0.05～0.8％，其溶劑為純化水。