[發明專利]抑制黃曲條跳甲精氨酸激酶蛋白表達的shRNA及制備方法、引物與應用在審
| 申請號： | 202010529603.6 | 申請日： | 2020-06-11 |
| 公開（公告）號： | CN111647602A | 公開（公告）日： | 2020-09-11 |
| 發明（設計）人： | 陳偉釗;莫亦琳;鐘路遙;王曉彥;莫蓓莘 | 申請（專利權）人： | 深圳大學;深圳大學龍華生物產業創新研究院 |
| 主分類號： | C12N15/113 | 分類號： | C12N15/113;C12N15/10;C12N15/11;A01N57/16;A01P7/04 |
| 代理公司： | 深圳市君勝知識產權代理事務所(普通合伙) 44268 | 代理人： | 劉芙蓉 |
| 地址： | 518060 廣東*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 抑制 黃曲條跳甲 精氨酸 激酶 蛋白 表達 shrna 制備 方法 引物 應用 | ||
1.抑制黃曲條跳甲精氨酸激酶蛋白表達的干擾性shRNA，其特征在于，所述干擾性shRNA依次包括靶序列、環形結構序列、靶序列的互補序列；
其中所述靶序列為GGAGUUCGAUGCCGUUAAGGA。
2.根據權利要求1所述的抑制黃曲條跳甲精氨酸激酶蛋白表達的干擾性shRNA，其特征在于，所述干擾性shRNA的序列結構如下所示：
3.一種如權利要求1-2任一項所述的抑制黃曲條跳甲精氨酸激酶蛋白表達的干擾性shRNA的制備方法，其特征在于，包括步驟：
根據靶基因的序列，設計出干擾性shRNA序列；
根據干擾性shRNA序列，設計一對引物序列；
利用所設計的一對引物，通過填充反應生成制備shRNA轉錄模板；
利用制備好的shRNA轉錄模板，通過體外轉錄的方式，制備得到干擾性shRNA。
4.根據權利要求3所述的抑制黃曲條跳甲精氨酸激酶蛋白表達的干擾性shRNA的制備方法，其特征在于，所述填充反應體系包括：所設計的一對引物、dNTPs、DNA聚合酶。
5.根據權利要求3所述的抑制黃曲條跳甲精氨酸激酶蛋白表達的干擾性shRNA的制備方法，其特征在于，所述體外轉錄體系包括：shRNA轉錄模板、T7 RNA聚合酶緩沖劑、NTPs、T7RNA聚合酶。
6.根據權利要求3所述的抑制黃曲條跳甲精氨酸激酶蛋白表達的干擾性shRNA的制備方法，其特征在于，所述引物序列為：
上游引物序列P1：
5’TAATACGACTCACTATAGGAGTTCGATGCCGTTAAGGACTTGCTTC3’；
下游引物序列P2：
5’AAGGAGTTCGATGCCGTTAAGGA GAAGCAAG3’。
7.一種用于制備如權利要求1-2任一項所述的抑制黃曲條跳甲精氨酸激酶蛋白表達的干擾性shRNA的引物，其特征在于，所述引物序列為：
上游引物序列P1：
5’TAATACGACTCACTATAGGAGTTCGATGCCGTTAAGGACTTGCTTC3’；
下游引物序列P2：
5’AAGGAGTTCGATGCCGTTAAGGA GAAGCAAG3’。
8.一種如權利要求1-2任一項所述的干擾性shRNA在制備用于抑制黃曲條跳甲精氨酸激酶蛋白表達的藥物中的應用。
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