[發明專利]一種定向制備右旋糖酐的方法

在審

• 申請號: 202010529510.3
• 申請日: 2020-06-11
• 公開（公告）號: CN111662940A
• 公開（公告）日: 2020-09-15
• 發明（設計）人: 戴婷;陳彥和;魏朝丹;田浩;屈娜;胡開群;柳念;邱睿
• 申請（專利權）人: 勁牌有限公司
• 主分類號: C12P19/14
• 分類號: C12P19/14;C12P19/08
• 代理公司: 北京文苑專利代理有限公司 11516
• 代理人: 王煒

1.一種定向制備右旋糖酐的方法，其特征在于，按照如下步驟進行：

(1)右旋糖酐蔗糖酶提取

制備得到腸膜明串珠菌培養液，獲取粗酶液；

(2)青稞提取物酶解

采用純水配制質量濃度為10％的青稞提取物混合液100mL，加入5％多糖水解酶，控制pH為5～6，放置于恒溫振蕩器反應4～6h，煮沸30min滅酶，8000r/min離心10min，取上清液，采用95％的酒精醇沉，除去沉淀；醇沉清液通過減壓旋蒸回收乙醇，得到濃縮的糖液。

(3)雙酶法合成右旋糖酐

向步驟(2)中得到的濃縮糖液中加入pH為5.4的醋酸-醋酸鈉緩沖溶液定容至100mL，依次加入右旋糖酐蔗糖酶和右旋糖酐酶，調控二者比例為10:1～1:10范圍內，控制反應時間2～40h，反應溫度為25～30℃，反應結束后恢復室溫。

(4)去除雜質

上述步驟(3)的反應液煮沸30min滅酶，8000r/min離心10min除去雜質，過濾，得到澄清透明的糖液用于右旋糖酐產品分離。

(5)乙醇醇沉

采用95％的酒精進行醇沉，沉淀物即為右旋糖酐產品。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(1)具體為：將腸膜明串珠菌培養至對數期，按照0.4％的接種量接種到產酶培養基；培養基為：蔗糖50g/L、酵母膏12.5g/L、牛肉膏20g/L、磷酸二氫鉀1.0g/L、磷酸氫二鈉3.6g/L，121℃高壓蒸汽滅菌15～20min；培養條件為20～30℃、100～200r/min，時間為20～30h；通過離心機進行離心處理，離心速度為8000～10000r/min，時間為15～20min，離心后棄去沉淀，收集上清液即為粗酶液。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(2)中所述青稞提取物的葡聚糖含量為60％。

4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(2)中所述多糖水解酶主要包括淀粉酶、纖維素酶、果膠酶、糖化酶、胰酶、蛋白酶、右旋糖酐酶。

5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(1)中粗酶液在保存過程中加入0.004％～0.010％CaCl₂，保存于4℃條件下，備用。

6.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(3)中右旋糖酐蔗糖酶用量為3.5～4.5U/mL。