[發明專利]一種定向制備右旋糖酐的方法

在審

• 申請號: 202010529510.3
• 申請日: 2020-06-11
• 公開（公告）號: CN111662940A
• 公開（公告）日: 2020-09-15
• 發明（設計）人: 戴婷;陳彥和;魏朝丹;田浩;屈娜;胡開群;柳念;邱睿
• 申請（專利權）人: 勁牌有限公司
• 主分類號: C12P19/14
• 分類號: C12P19/14;C12P19/08
• 代理公司: 北京文苑專利代理有限公司 11516
• 代理人: 王煒

本發明公開了一種定向制備右旋糖酐的方法，其采用的原料為青稞提取物，通過控制右旋糖酐蔗糖酶和右旋糖酐酶二者的比例，可以定向制備不同分子量的右旋糖酐產品，即可制備得到右旋糖酐10、右旋糖酐20、右旋糖酐40、右旋糖酐70、右旋糖酐100和右旋糖酐1000等產品。

技術領域

本發明屬于醫藥原料制備技術領域，具體涉及一種定向制備右旋糖酐的方法。

背景技術

青稞是一種高原谷類作物，主要是作為糧食食用、飼料，以及釀酒。研究發現，青稞中含有豐富的葡聚糖，是麥類作物中β-葡聚糖含量最高的作物。青稞在提取β葡聚糖時，通過水提法、酸法、減法等得到青稞多糖提取物，其中除含有一定量的β-葡聚糖外，還含有大量的其他多糖。現有的研究主要集中于青稞β-葡聚糖的提取制備與功能研究，中國專利申請CN107226871A公開了一種青稞β葡聚糖的制備方法，其以青稞麩皮為原料，經調漿，糊化后，接入商品化釀酒活性干酵母，利用酵母發酵，所得的發酵液經離心、濃縮、醇沉、水溶、過濾、真空冷凍干燥，最終得到得率為4.32-4.92％，純度為85.25-91.61％，收得率為82-95％的青稞β-葡聚糖產品。中國專利申請CN105777932A公開了一種具有輔助降血糖功效的低分子量青稞β-葡聚糖的制備方法，是首先將青稞米粉碎成10～50目，然后加水，調節pH至8～10后提取1～2小時，回調pH至2.5～6.5，離心后在上清液中加入物料總重量0.1～0.4％的α-淀粉酶酶解40～60分鐘，再加入物料總重量0.13％～0.4％糖化酶酶解40～60分鐘，滅酶，離心、濃縮后醇沉、干燥即得數均分子量為6.827×10²～7.968×10⁴β-葡聚糖。

藥用的右旋糖酐分子量在1萬到10萬之間，對人體具有擴增血容量、抗凝血、降低血液粘度的作用，被公認為優質的人工血漿制品和器官保護液并應用于臨床。在食品行業中，右旋糖酐主要用于飲料和糕點的穩定劑、保濕劑、增稠劑和增量劑。面包中添加右旋糖酐提高柔軟度；右旋糖酐能提高冷凍乳制品熱沖擊穩定性和熔融溫度。右旋糖酐鐵片可以口服，用于治療缺鐵性貧血。中國專利申請CN 102676615A公開了雙酶法制備分子量可控的藥用右旋糖酐，其產品種類包括右旋糖酐70，右旋糖酐40以及右旋糖酐20；其制備步驟分為兩大步，第一大步為高分子右旋糖酐的合成，首先是采用右旋糖酐蔗糖酶催化蔗糖制備高分子右旋糖酐，該新方法使蔗糖轉化為右旋糖酐的轉化率達到95％以上；第二大步為高分子右旋糖的可控性降解，采用高酶活性的右旋糖酐酶催化降解高分子右旋糖酐為藥用右旋糖酐，實現右旋糖酐的分子量可控降解。該專利申請中右旋糖酐的生產原料一直都是以蔗糖為主，酶法生產右旋糖酐與發酵法生產右旋糖酐相比，酶法具有更好的可控性以及分子量的可調節性。

目前，還未出現采用青稞多糖提取物在制備右旋糖酐中的應用。

發明內容

本發明目的是提供一種新原料制備右旋糖酐的技術，以青稞的多糖提取物為原料定向制備不同分子量的右旋糖酐。

一種定向制備右旋糖酐的方法，該方法按照如下步驟進行：

(1)右旋糖酐蔗糖酶提取

制備得到腸膜明串珠菌培養液，獲取粗酶液；

(2)青稞提取物酶解

采用純水配制質量濃度為10％的青稞提取物混合液100mL，加入5％多糖水解酶，控制pH為5～6，放置于恒溫振蕩器反應4～6h，煮沸30min滅酶，8000r/min離心10min，取上清液，采用95％的酒精醇沉，除去沉淀；醇沉清液通過減壓旋蒸回收乙醇，得到濃縮的糖液；

(3)雙酶法合成右旋糖酐

向步驟(2)中得到的濃縮糖液中加入pH為5.4的醋酸-醋酸鈉緩沖溶液定容至100mL，依次加入右旋糖酐蔗糖酶和右旋糖酐酶，調控二者比例為10:1～1:10范圍內，控制反應時間2～40h，反應溫度為25～30℃，反應結束后恢復室溫。