[發明專利]一種用于生鮮奶品質評價的標記物

在審

• 申請號: 202010529186.5
• 申請日: 2020-06-11
• 公開（公告）號: CN111551657A
• 公開（公告）日: 2020-08-18
• 發明（設計）人: 楊永新;吳濤;趙小偉;齊云霞;黃冬維;丁海生;程廣龍;趙輝玲;韓榮偉
• 申請（專利權）人: 安徽省農業科學院畜牧獸醫研究所
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/88
• 代理公司: 合肥信誠兆佳知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 34159
• 代理人: 尉敏

本發明公開了一種用于生鮮奶品質評價的標記物，所述標記物為天青殺素1。本發明公開了上述標記物在評價生鮮奶品質和/或奶牛乳腺感染狀況中的應用。本發明公開了上述標記物用于生鮮奶品質和/或奶牛乳腺感染狀況評價的方法，取待測牛奶樣品，提取乳清蛋白，對所得乳清蛋白進行酶解，然后采用液相色譜串聯質譜法檢測其中所述標記物以判斷生鮮奶品質和/或奶牛乳腺感染狀況。本發明通過建立天青殺素1與生鮮奶品質和/或奶牛乳腺感染狀況之間的相關性，為科學、準確、簡便評價生鮮奶品質和/或奶牛乳腺感染狀況提供新依據。

技術領域

本發明涉及食品檢測技術領域，尤其涉及一種用于生鮮奶品質評價的標記物及其應用和評價方法。

背景技術

牛奶中主要營養物質包括蛋白質、脂肪、維生素、礦物質和糖類等，也含有豐富的生物活性物質，但其組成受諸多因素的影響，其中奶牛乳腺感染病原菌是最為常見的引起生鮮奶品質變化的因素。奶牛患上乳房炎后，可直接造成牛奶廢棄、產奶量減少、生鮮奶品質下降、治療費用增加等經濟損失。

監測奶牛健康狀況，以確保提供優質牛奶是國內奶牛養殖場的重要工作之一。目前，奶中體細胞數是評價奶牛乳腺健康和生鮮奶品質最為常用的指標。一般認為，體細胞數低于20萬/mL時為優質奶，該牛奶來源的奶牛健康；體細胞數在20萬/mL和50萬/mL之間時為合格奶，該牛奶來源的奶牛較為健康；體細胞數超過50萬/mL時，該牛奶來源的奶牛呈臨床型乳房炎。然而，日齡較大、胎次較高的奶牛所產牛奶中體細胞數時有變動，特別是奶牛受應激時所產牛奶體細胞數會增加，從而影響用體細胞數評價生鮮奶品質的準確性。

此外，目前奶中體細胞數的檢測方法有顯微鏡鏡檢法、熒光顯微鏡計數法、加利福尼亞乳房炎試驗(CMT)和高速體細胞計數法(如丹麥的fossmat-ic系列計數儀)等。顯微鏡鏡檢法是測定牛奶體細胞數的標準方法，但制備樣品計數、鏡檢費時費力，不適于現場快速、大批量樣品使用；熒光顯微鏡計數法的制片、鏡檢要花費許多時間，不適合于大量、快速的檢測應用；加利福尼亞乳房炎試驗(CMT)雖然快速，但不能得到具體的體細胞數，只能劃分出1個大致的數量范圍，并且操作者要有豐富的經驗，否則容易引起誤判；高速體細胞計數儀售價昂貴，不能普及使用。

基于以上背景乳品行業內亟需一種準確度更高、檢測方法更為便捷的新標記物來評價奶牛乳腺感染狀況和生鮮奶品質情況。

發明內容

本發明的目的是為了解決現有技術中存在的缺點，而提出的一種用于生鮮奶品質評價的標記物及其應用和評價方法，通過建立天青殺素1與生鮮奶品質和/或奶牛乳腺感染狀況之間的相關性，為科學、準確、簡便評價生鮮奶品質和/或奶牛乳腺感染狀況提供新依據。

一種用于評價生鮮奶品質和/或奶牛乳腺感染狀況的標記物，所述標記物為天青殺素1。

一種上述標記物在評價生鮮奶品質和/或奶牛乳腺感染狀況中的應用。

一種上述標記物用于生鮮奶品質和/或奶牛乳腺感染狀況評價的方法，取待測牛奶樣品，提取乳清蛋白，對所得乳清蛋白進行酶解，然后采用液相色譜串聯質譜法檢測其中所述標記物的含量以判斷生鮮奶品質和/或奶牛乳腺感染狀況。

優選地，當天青殺素1的相對含量小于等于10⁶，則奶牛健康，生鮮奶品質優；當天青殺素1的相對含量大于10⁶小于等于10⁷，則奶牛可能患有隱性乳房炎，生鮮奶品質合格；當天青殺素1的相對含量大于10⁷，則奶牛患有乳房炎，生鮮奶品質不合格。

優選地，液相色譜串聯質譜法檢測的具體操作如下：采用質量分數為0.1％的甲酸溶液溶解酶解肽段，然后注入液相色譜儀進行測定，色譜流出液注入質譜儀進行質譜檢測。

優選地，液相色譜條件如下：以質量分數為0.1％的甲酸水溶液為流動相A，以質量分數為0.1％的甲酸水溶液與乙腈按體積比為5：95混合液為流動相B，流速為300nL/min，梯度洗脫，進樣量為5-10μL。