[發(fā)明專利]一種用于生鮮奶品質(zhì)評價(jià)的標(biāo)記物

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010529186.5
• 申請日: 2020-06-11
• 公開（公告）號: CN111551657A
• 公開（公告）日: 2020-08-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊永新;吳濤;趙小偉;齊云霞;黃冬維;丁海生;程廣龍;趙輝玲;韓榮偉
• 申請（專利權(quán)）人: 安徽省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/88
• 代理公司: 合肥信誠兆佳知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 34159
• 代理人: 尉敏

1.一種用于生鮮奶品質(zhì)評價(jià)的標(biāo)記物，其特征在于，所述標(biāo)記物為天青殺素1。

2.一種如權(quán)利要求1所述標(biāo)記物在評價(jià)生鮮奶品質(zhì)和/或奶牛乳腺感染狀況中的應(yīng)用。

3.一種如權(quán)利要求1所述標(biāo)記物用于生鮮奶品質(zhì)和/或奶牛乳腺感染狀況評價(jià)的方法，其特征在于，取待測牛奶樣品，提取樣品乳清蛋白，對所得乳清蛋白進(jìn)行酶解，然后采用液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法檢測其中所述標(biāo)記物的含量以判斷生鮮奶品質(zhì)和/或奶牛乳腺感染狀況。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述方法，其特征在于，當(dāng)天青殺素1的相對含量小于等于10⁶，則奶牛健康，生鮮奶品質(zhì)優(yōu)；當(dāng)天青殺素1的相對含量大于10⁶小于等于10⁷，則奶牛可能患有隱性乳房炎，生鮮奶品質(zhì)合格；當(dāng)天青殺素1的相對含量大于10⁷，則奶?；加腥榉垦祝r奶品質(zhì)不合格。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述方法，其特征在于，液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法檢測的具體操作如下：采用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1％的甲酸溶液溶解酶解的肽段，然后注入液相色譜儀進(jìn)行測定，色譜流出液注入質(zhì)譜儀進(jìn)行質(zhì)譜檢測。

6.根據(jù)權(quán)利要求3所述方法，其特征在于，液相色譜條件如下：以質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1％的甲酸水溶液為流動相A，以質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1％的甲酸水溶液與乙腈按體積比為5：95混合液為流動相B，流速為300nL/min，梯度洗脫。

7.根據(jù)權(quán)利要求3所述方法，其特征在于，質(zhì)譜檢測條件如下：噴霧電壓為2.3kV，離子傳輸管溫度為275℃，S-Lens射頻為55％；全掃描范圍為300-2000m/z，全掃描分辨率為30000@m/z400，離子最大注入時(shí)間為200ms，AGC為1E6，碰撞能量為30％；二級掃描分辨率為15000@m/z400，離子最大注入時(shí)間為100ms，AGC為1E4。

8.根據(jù)權(quán)利要求3所述方法，其特征在于，牛奶樣品提取乳清蛋白的具體步驟如下：取待測牛奶樣品，在2500-4000×g，4-6℃條件下離心15-40min，收集中間乳清層，調(diào)節(jié)乳清的pH值至4.6，然后在10000-15000×g 4-6℃條件下離心10-30min，收集上層清液，得到乳清蛋白。

9.根據(jù)權(quán)利要求3所述方法，其特征在于，對所得乳清蛋白進(jìn)行酶解的具體操作如下：向所得乳清蛋白中加入濃度為50-100mmol/L的二硫蘇糖醇，再加入濃度為50-100mmol/L碘乙酰胺溶液，室溫避光，接著加入胰蛋白酶溶液，乳清蛋白與胰蛋白酶質(zhì)量比為25-80：1在37℃過夜，再加入甲酸溶液，接著12000-14000×g，離心20-40min，取上層液進(jìn)行干燥得到酶解肽段。