[發(fā)明專利]一種熒光定量PCR檢測非洲豬瘟的引物探針組及其應用在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202010525553.4 | 申請日： | 2020-06-10 |
| 公開（公告）號： | CN111500790A | 公開（公告）日： | 2020-08-07 |
| 發(fā)明（設計）人： | 王印;陳婉婷;張鵬飛;姜睿姣;朱光恒;涂藤;羅燕;楊澤曉;姚學萍 | 申請（專利權）人： | 四川農(nóng)業(yè)大學 |
| 主分類號： | C12Q1/70 | 分類號： | C12Q1/70;C12Q1/6851;C12N15/11;C12R1/93 |
| 代理公司： | 北京眾合誠成知識產(chǎn)權代理有限公司 11246 | 代理人： | 劉妮 |
| 地址： | 611130 四*** | 國省代碼： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 熒光 定量 pcr 檢測 非洲 豬瘟 引物 探針 及其 應用 | ||
1.一種熒光定量PCR檢測非洲豬瘟的引物探針組，其特征在于，所述的引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1～2所示，所述的探針的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。
2.根據(jù)權利要求1所述的一種熒光定量PCR檢測非洲豬瘟的引物探針組，其特征在于，所述的探針5′端標記有報告基團，3′端標記有熒光淬滅基團。
3.根據(jù)權利要求2所述的一種熒光定量PCR檢測非洲豬瘟的引物探針組，其特征在于，所述的報告基團為FAM，所述的熒光淬滅基團為BHQ1。
4.權利要求1所述的引物探針組在檢測非洲豬瘟中的應用。
5.一種熒光定量PCR用于檢測非洲豬瘟的試劑盒，其特征在于，所述的試劑盒包括核苷酸序列如SEQ ID NO.1～3的引物探針組。
6.根據(jù)權利要求6所述的試劑盒，其特征在于，所述的試劑盒包括試劑：2×Pro TaqHSProbe Premix，MGF360-F，MGF360-R，MGF360-Taq Man，DNase/RNase-Free DeionizedWater。
7.一種熒光定量PCR用于檢測非洲豬瘟的方法，其特征在于，使用試劑盒提取病毒基因組DNA，利用權利要求1引物和探針按照反應程序進行PCR擴增。
8.根據(jù)權利要求7所述的檢測非洲豬瘟的方法，其特征在于，反應體系為25μL：2×ProTaqHS Probe Premix 12.5μL、上下游引物各1μL、探針1μL、模板DNA 2μL，DNase/RNase-Free Deionized Water加至25μL。
9.根據(jù)權利要求8所述的檢測非洲豬瘟的方法，其特征在于，所述的PCR上下游引物和探針的濃度為50pmol/μL。
10.根據(jù)權利要求7所述的檢測非洲豬瘟的方法，其特征在于，所述的PCR反應程序為：50℃2min；95℃預變性10min；95℃15s，55℃1min，40個循環(huán)。
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