[發明專利]一種核桃低聚肽粉及其制備方法和用途

在審

• 申請號: 202010521137.7
• 申請日: 2020-06-10
• 公開（公告）號: CN111635922A
• 公開（公告）日: 2020-09-08
• 發明（設計）人: 王昭日;楊進平;崔玉梅;李易達
• 申請（專利權）人: 杏輝天力（杭州）藥業有限公司
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K1/14;C07K1/34;A23L33/18;A23J3/34;A23J1/14;A61K38/01;A61P25/20;A61P1/00;A61K36/52
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本發明涉及一種核桃低聚肽粉及其制備方法和用途。所述低聚肽粉肽含量在80wt％以上，其中95％以上核桃肽的分子量小于1500Dalton。所述方法包括使用高效逆流提取法提取核桃蛋白，過濾、酶解，再將蛋白酶解液依次經過微濾膜與超濾膜高效分離純化，最后濃縮噴霧，得到低聚肽粉。所述核桃低聚肽粉有改善睡眠作用、酒精性脂肪肝的保護作用、抑制脂肪的吸收、調節腸道pH值以改善有益菌群、增強營養吸收的功效。

技術領域

本發明涉及一種高純度、低分子量的核桃低聚肽肽產品。本發明還涉及到核桃肽的制備并酶解，生成低聚核桃肽粉的制備方法，該肽粉可用作食品、保健食品或者藥品。

背景技術

核桃(Juglans regia L)又名胡桃，屬于四大堅果之一，具有很高的營養藥用價值。在我國古醫藥書籍中,有明確記載,李時珍《本草綱目》記述“補氣養血、潤燥化痰、益命門、利三焦，溫肺潤腸。治肺潤腸。治虛寒喘咳，腰腳重疼，心腹疝痛，血痢腸風，散腫毒，……”宋劉翰《開寶本草》載“胡桃(即核桃)味甘、平、無毒。食之令人肥健，潤肌黑發，取瓤燒令黑，未斷煙，和松脂，研傅瘰疬瘡”。唐化孟詵《食療本草》中說，核桃仁能“通經脈、黑須發，常服骨肉細膩光潤”。崔禹錫的《食經》說它“多食利小便，去五痔”。《醫林纂要》一書的評價是，可以“補腎，潤命門，固精，潤大腸，通熱秘，止寒瀉虛瀉。”等等。

核桃中含有豐富的蛋白質、脂肪等營養成分，含量比較均衡，屬于比較理想的高蛋白、高脂肪的食物，據報導，核桃仁中含有高達52％-70％的油脂，其中大部分為不飽和脂肪酸，另外還含有約24％的蛋白質，12％-16％的碳水化合物，1.5％-2％的纖維素，以及1.7％-2％的礦物質。核桃中富含人體必需的氨基酸，且氨基酸比例比較合理，其中對人體生理作用有著重要功能的谷氨酸、天冬氨酸、精氨酸含量均較高，其中谷氨酸還是影響人體特別是青少年智力及記憶發育的重要功能物質。

為了獲得比核桃原蛋白在營養、功能性及生物活性上更加優良的低聚肽粉，已嘗試了多種制備方法。

專利CN 101228918 A將核桃粕粉碎，超聲波法提取核桃蛋白，將核桃蛋白真空干燥后，再使用蛋白酶進行酶解，離心，使用透析袋對上清液進行透析，經濃縮透析液并真空干燥得到含量在60％～80％的肽粉。該方法操作復雜，肽含量較低，肽分子量的分布也不明確，同時使用超聲提取蛋白，透析袋進行精致，無法進行大規模制備。

專利CN 102406050 A使用堿提酸沉方法提取蛋白質，經冷凍干燥得到核桃蛋白粉，蛋白粉經酶解后，用300Mpa高壓處理10min，冷凍干燥得核桃肽粉。此制備方法需超高壓設備和冷凍干燥機，成本高，不適宜大規模生產；該發明專利雖然提供了該法制備的核桃肽粉的分子量分布，但產品中肽含量不明確。

專利CN 103103244 B使用堿提酸沉的方法提取蛋白質，并用微波結合超聲波處理后，酶解得到多肽粉。該法仍不適用大規模生產，并且沒有對酶解產品中肽含量進行測定。

專利CN 104293870 A先使用CO₂超臨界萃取儀去除油脂后得到的核桃粕，堿提酸沉后噴霧得到核桃蛋白粉，再將蛋白粉制成懸濁液并煮沸破壞蛋白質的結構，使用堿性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和菠蘿蛋白酶分段四步酶解核桃蛋白液，經5000Dalton或者8000Dalton超濾膜精制后使用離子交換樹脂脫鹽，最后噴霧干燥得到核桃肽粉。此專利涉及到去除油脂時使用超臨界萃取儀，增加成本，不易于大生產；涉及到4種酶分段四步酶解，步驟繁瑣、成本高；涉及到酶解完成后，未經過微濾膜除雜，直接進行超濾膜，造成超濾膜易阻塞，超濾時間延長，降低多肽收率，同時縮短超濾膜使用壽命；此專利未涉及到多肽產品中肽的百分含量和肽的分子量分布。

可見，以上核桃多肽的制備條件苛刻，工藝步驟繁瑣，很難實現大規模生產，因此尋找一套工藝簡單、低成本、高含量、較高活性的核桃多肽的制備方法已經成為尋找大規模生產的研究熱點之一。

發明內容