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[發明專利]基于氧化損傷堿基的熒光探針及用于直接檢測DNA甲基化的試劑盒與方法有效

專利信息
申請號: 202010518312.7 申請日: 2020-06-09
公開(公告)號: CN111778316B 公開(公告)日: 2022-12-27
發明(設計)人: 張春陽;張艷;李琛琛 申請(專利權)人: 山東師范大學
主分類號: C12Q1/6827 分類號: C12Q1/6827;C12Q1/682;C12Q1/6886;C12N15/11
代理公司: 濟南圣達知識產權代理有限公司 37221 代理人: 鄭平
地址: 250014 山*** 國省代碼: 山東;37
權利要求書: 查看更多 說明書: 查看更多
摘要:
搜索關鍵詞: 基于 氧化 損傷 堿基 熒光 探針 用于 直接 檢測 dna 甲基化 試劑盒 方法
【權利要求書】:

1.一種非疾病診斷目的的直接檢測DNA甲基化的方法,其特征在于,包括:

亞硫酸氫鹽處理要檢測的靶DNA;

將熒光探針與亞硫酸氫鹽處理過的DNA雜交,形成雙鏈DNA;

所述雙鏈DNA在hOGG1酶的輔助下誘導熒光探針的循環裂解;

檢測熒光信號,對DNA甲基化進行定性/定量分析;

所述熒光探針的序列為:ROX-ATC CGC TCT TCC T-BHQ2,其中,帶下劃線的粗體G堿基表示8-oxoG修飾。

2.如權利要求1所述的直接檢測DNA甲基化的方法,其特征在于,甲基化DNA的濃度為10-13M至10-9M范圍內和2×10-9M至10-7M范圍內,熒光強度與甲基化DNA的濃度對數線性關系。

3.如權利要求1所述的直接檢測DNA甲基化的方法,其特征在于,甲基化DNA的濃度在10-13M至10-9M范圍內時,回歸方程為F=1466+101.7log10C,F是605nm處的熒光強度,C是甲基化DNA濃度。

4.如權利要求1所述的直接檢測DNA甲基化的方法,其特征在于,甲基化DNA的濃度在2×10-9M至10-7M范圍內時,回歸方程為F=12506+1367log10C,F是605nm處的熒光強度,C是甲基化DNA濃度。

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1、專利原文基于中國國家知識產權局專利說明書;

2、支持發明專利 、實用新型專利、外觀設計專利(升級中);

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4、內容包括專利技術的結構示意圖流程工藝圖技術構造圖

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