[發(fā)明專利]基于氧化損傷堿基的熒光探針及用于直接檢測(cè)DNA甲基化的試劑盒與方法有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 202010518312.7 | 申請(qǐng)日： | 2020-06-09 |
| 公開(kāi)（公告）號(hào)： | CN111778316B | 公開(kāi)（公告）日： | 2022-12-27 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 張春陽(yáng);張艷;李琛琛 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 山東師范大學(xué) |
| 主分類號(hào)： | C12Q1/6827 | 分類號(hào)： | C12Q1/6827;C12Q1/682;C12Q1/6886;C12N15/11 |
| 代理公司： | 濟(jì)南圣達(dá)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 37221 | 代理人： | 鄭平 |
| 地址： | 250014 山*** | 國(guó)省代碼： | 山東;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 基于 氧化 損傷 堿基 熒光 探針 用于 直接 檢測(cè) dna 甲基化 試劑盒 方法 | ||
1.一種非疾病診斷目的的直接檢測(cè)DNA甲基化的方法，其特征在于，包括：
亞硫酸氫鹽處理要檢測(cè)的靶DNA；
將熒光探針與亞硫酸氫鹽處理過(guò)的DNA雜交，形成雙鏈DNA；
所述雙鏈DNA在hOGG1酶的輔助下誘導(dǎo)熒光探針的循環(huán)裂解；
檢測(cè)熒光信號(hào)，對(duì)DNA甲基化進(jìn)行定性/定量分析；
所述熒光探針的序列為：ROX-ATC C
2.如權(quán)利要求1所述的直接檢測(cè)DNA甲基化的方法，其特征在于，甲基化DNA的濃度為10-13M至10-9M范圍內(nèi)和2×10-9M至10-7M范圍內(nèi)，熒光強(qiáng)度與甲基化DNA的濃度對(duì)數(shù)線性關(guān)系。
3.如權(quán)利要求1所述的直接檢測(cè)DNA甲基化的方法，其特征在于，甲基化DNA的濃度在10-13M至10-9M范圍內(nèi)時(shí)，回歸方程為F＝1466+101.7log10C，F(xiàn)是605nm處的熒光強(qiáng)度，C是甲基化DNA濃度。
4.如權(quán)利要求1所述的直接檢測(cè)DNA甲基化的方法，其特征在于，甲基化DNA的濃度在2×10-9M至10-7M范圍內(nèi)時(shí)，回歸方程為F＝12506+1367log10C，F(xiàn)是605nm處的熒光強(qiáng)度，C是甲基化DNA濃度。
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