[發明專利]一種復方中藥免疫脂質體及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 202010517329.0
• 申請日: 2020-06-09
• 公開（公告）號: CN111603569A
• 公開（公告）日: 2020-09-01
• 發明（設計）人: 黃念;凌昌全;李威;王麗娜;杜娟;何煜宇;干正;王曼;阮亦;賀海威;茍浩;董霞;陶萬茹;黃勇
• 申請（專利權）人: 上海長海醫院
• 主分類號: A61K47/69
• 分類號: A61K47/69;A61K47/68;A61K31/585;A61K38/17;A61P1/16;A61P35/00
• 代理公司: 上海申浩律師事務所 31280
• 代理人: 李陽

本發明涉及中藥復方制劑領域，具體是一種由抗體、脂質原料和中藥單體蟾毒靈、蜂毒素自組裝的復方中藥免疫脂質體及其制備方法和應用。本發明優點在于：本發明以蟾毒靈、蜂毒素、抗體以及脂質原料作為基本材料，制備出一種既具有抗體主動靶向又可以同時負載具有溶血和親水性的蜂毒素和疏水性的蟾毒靈的復方中藥免疫脂質體，其可以利用腫瘤組織的EPR效應實現藥物在腫瘤內的富集。

技術領域

本發明涉及中藥復方制劑領域，具體地說，是一種復方中藥免疫脂質體及其制備方法和應用。

背景技術

原發性肝癌是受到全球關注的重大癌癥之一，在全球腫瘤相關原因死亡中位列第3位。在我國，原發性肝癌的發病率在各類腫瘤中排第4位，死亡率位列第3位，新發病例和死亡病例數量均占全球總數的一半以上，是一個肝癌大國。目前，肝癌的治療手段有肝移植、肝癌切除術、肝動脈化療栓塞術、立體定向放療、射頻消融術及分子靶向治療等。大多數肝癌患者在診斷時已經處于中晚期，手術切除僅是不到20％患者的選擇。索拉非尼(Sorafenib)是美國FDA推薦的用于肝癌的分子靶向一線治療藥物，主要用于中晚期肝癌患者的治療。然而，臨床研究結果顯示，與對照組比較，索拉非尼僅能延長約3個月的中位生存時間(7.9個月vs 10.7個月；P0.001)，僅對30％患者有效，且有手足綜合征、腹瀉等諸多副作用。此外，索拉非尼還容易出現耐藥，獲得性耐藥通常在6個月內發生。

在我國，中醫藥在肝細胞癌的治療中發揮著極為重要的作用，具有增效減毒、調節免疫力、防治肝癌復發轉移等作用，有效改善肝細胞癌患者的臨床癥狀、提高生活質量。蟾酥是中華大蟾蜍(Bufo bufo gargarizans Cantor)或黑框蟾蜍(Bufo melanostictusSchneider)耳后腺及表皮腺體的分泌物，呈白色乳狀液體或淺黃色漿液。《本草匯言》認為蟾酥能“化解一切瘀郁壅滯諸疾，如積毒、積塊、積脹、內疔癰腫之證，有攻毒拔毒之功”，《本草綱目》則記載蟾酥能“治一切惡腫”，是中醫臨床上重要的抗腫瘤藥物。現代研究表明，中藥蟾酥中的重要活性成分之一蟾毒靈(Bufalin)具有較強的抗肝癌生長及轉移的作用，可以調節線粒體這一細胞內“能量供應站”及腫瘤轉移“加速器”如PI3K/Akt信號通路、Wnt/β-catenin信號通路等環節。此外，蟾毒靈可以通過內質網應激促進肝癌細胞的凋亡，內質網應激特別是PERK/eIF2α/CHOP通路參與了蟾毒靈誘導的自噬反應，通過AMPK/mTOR/p70S6K-4EBP-1通路誘導肝癌細胞的自噬，并作用于細胞核，干擾其轉錄調控。

蜂毒素(Melittin)，又名蜂毒肽，由Habermann等最早從歐洲蜜蜂(ApisMellifera)的毒液中分離出來，占蜂毒干重的50％以上，由26個氨基酸(H-Gly-Ile-G1y-Ala-Val-Leu-Lys-Val-Leu-Thr-Thr-Gly-Leu-Pro-Ala-Leu-Ile-Ser-Tyr-Ile-Lys-Arg-Lys-Arg-Gin-Gin-NH₂)組成，主要通過直接抑制細胞運動分子Rac1信號通路、VEGF信號通路等腫瘤侵襲的作用。

但是關于蜂毒素和蟾毒靈聯合應用提高抗肝癌轉移療效，發揮協同抗肝癌轉移作用目前還未見報道。

發明內容

蜂毒素和蟾毒靈能通過不同的機制發揮良好的抗肝癌作用，兩者的聯合應用有望提高抗肝癌轉移療效，發揮協同抗肝癌轉移作用。兩者聯合應用，需要解決兩個關鍵性技術問題。

首先，蜂毒素強烈的溶血副作用極大地限制了其應用。由于蜂毒素分子結構中沒有羧基，且含有3個賴氨酸和2個精氨酸殘基，使其成為一種強堿性肽(pH＝10)，具有較強的溶血副作用。其次，蟾毒靈的水溶性較低限制了其生物利用。蟾毒靈水溶性差、毒性強、半衰期短限制了其臨床應用。