[發明專利]海洋抗膠質瘤活性物質異壁咔啉堿A及制備和用途

有效

• 申請號: 202010512843.5
• 申請日: 2020-06-08
• 公開（公告）號: CN111747955B
• 公開（公告）日: 2021-05-04
• 發明（設計）人: 張治針;秦樂
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: C07D471/14
• 分類號: C07D471/14;A61K31/437;A61P35/00;C12P17/18;C12N1/20;C12R1/01
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司 33200
• 代理人: 趙杭麗

本發明提供一種海洋抗膠質瘤活性物質異壁咔啉堿A及制備和用途，本發明利用源自海洋沉積物中的藍灰色異壁放線菌的大米發酵產物制備獲得異壁咔啉堿A，藍灰色異壁放線菌，其分類命名為Actinoalloteichus cyanogriseus ZZ1866，保藏編號:CCTCC M 2020121。所述異壁咔啉堿A顯著抑制膠質瘤細胞的增殖，可在制備抗膠質瘤藥物方面具有應用前景。異壁咔啉堿A的化學結構式為：

技術領域

本發明屬醫藥領域,涉及海洋抗膠質瘤活性物質異壁咔啉堿A及制備和用途，是從藍灰色異壁放線菌Actinoalloteichus cyanogriseus ZZ1866的代謝產物中獲得的具有抗膠質瘤活性的化合物異壁咔啉堿A(Actinoallocarboline A)及其制備方法和在制備抗膠質瘤藥物中的應用。

背景技術

腦膠質瘤是發生于腦神經膠質組織的一種最常見的原發性中樞神經系統腫瘤，其發病率呈逐年上升趨勢。目前對膠質瘤患者的標準治療方式是手術切除，給予替莫唑胺和放療，之后單獨給予替莫唑胺輔助治療，但是由于膠質瘤呈侵襲性生長，腫瘤組織與正常組織無明顯界限，因此手術切除無法完全去除病灶組織，放療、化療手段只能對一定比例的腫瘤細胞起作用，且血腦屏障和血管腦腫瘤屏障會將大多數化學抗癌藥物阻滯在外，導致膠質瘤發生部位藥物濃度過低而無法殺死腫瘤細胞，給藥濃度增大又會對正常組織帶來嚴重的副作用。盡管分子靶向藥物為腫瘤的治療開辟了新途徑，由于腫瘤干細胞和耐藥性問題的存在，膠質瘤在進行治療后也及其容易復發。顯然，臨床上需要療效更好、安全性更高和作用機制獨特的新型抗膠質瘤藥物。

海洋生物不僅種類繁多資源豐富，且進化出了獨特的代謝途徑來抵御海洋極端環境，使得海洋天然產物具有區別于陸地的結構特異性。而海洋微生物因其生境特殊、遺傳可控、可放大發酵等特性逐漸在海洋生物研究中成為研究重心，其中，放線菌是發現抗腫瘤藥或藥物先導化合物的重要來源。

發明內容

本發明的第一個目的是提供一個新化合物異壁咔啉堿A(ActinoallocarbolineA), 其化學結構式為：

本發明的第二個目的是提供異壁咔啉堿A的制備方法，通過以下步驟實現：

(1)藍灰色異壁放線菌Actinoalloteichus cyanogriseus ZZ1866的分離培養

取空氣干燥的海底沉積物用滅菌自來水溶解后搖床振蕩過夜，將樣品混懸液稀釋成一定的濃度，取一定量的樣品稀釋液均勻分散到含有固體培養基的培養皿中，在室溫條件下培養一定時間后,將不同的菌落分別轉移到另一含有固體培養基的培養皿中，在室溫條件下繼續培養一定時間。最后將生長良好的ZZ1866單一菌落接種到斜面培養基培養后置4℃冰箱保存備用。

所述的海底沉積物是從浙江省舟山市普陀島附近的海域獲得；所述樣品稀釋液的濃度為1×10^-4～1×10^-2g/mL；所述振蕩的轉速為160～180rpm；所述樣品稀釋液的取樣量為200μL；所述培養皿和斜面培養的固體培養基均為高氏瓊脂培養基；所述的室溫培養溫度為20～28℃；所述的培養時間為7～14天。

(2)藍灰色異壁放線菌Actinoalloteichus cyanogriseus ZZ1866的菌種鑒定

上述步驟(1)分離培養所獲得的菌株ZZ1866用目前實驗室普遍使用的16S rDNA序列分析方法鑒定其種類，確定為藍灰色異壁放線菌，分類命名為Actinoalloteichuscyanogriseus ZZ1866，已被中國典型培養物保藏中心-武漢中心保藏，保藏編號:CCTCCNO: M 2020121。

(3)藍灰色異壁放線菌Actinoalloteichus cyanogriseus ZZ1866固體發酵產物的制備