[發明專利]海洋抗膠質瘤活性物質異壁咔啉堿A及制備和用途

有效

• 申請號: 202010512843.5
• 申請日: 2020-06-08
• 公開（公告）號: CN111747955B
• 公開（公告）日: 2021-05-04
• 發明（設計）人: 張治針;秦樂
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: C07D471/14
• 分類號: C07D471/14;A61K31/437;A61P35/00;C12P17/18;C12N1/20;C12R1/01
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司 33200
• 代理人: 趙杭麗

1.一種海洋抗膠質瘤活性物質異壁咔啉堿A的制備方法，其特征在于，通過以下步驟實現：

(1) 藍灰色異壁放線菌發酵產物的制備

將藍灰色異壁放線菌的菌株接種到含有液體培養基的大三角燒瓶中，將含有異壁放線菌的菌種培養液在室溫條件下振蕩培養后得到菌種液，最后將菌種液轉入含有大米固體培養基的大三角燒瓶中，特定溫度靜置培養一定時間后，得到含有活性物質異壁咔啉堿A的培養物；藍灰色異壁放線菌，其分類命名為Actinoalloteichus cyanogriseus ZZ1866，已被中國典型培養物保藏中心保藏，保藏編號: CCTCC M 2020121，保藏日：2020.5.15；保藏地址：中國.武漢.武漢大學；

(2) 異壁咔啉堿A的提取分離純化

將上述步驟(1)獲得的菌株ZZ1866的固體發酵產物用乙酸乙酯提取得到乙酸乙酯提取物，將乙酸乙酯總提取物先用硅膠柱層析分離，用環己烷和乙酸乙酯混合溶劑以及乙酸乙酯和甲醇混合溶劑梯度洗脫，收集洗脫液，用高效液相色譜檢測各組分，合并含有相同成分的組分，得到A-F六個組分，組分C再用十八烷基硅烷鍵合硅膠柱層析分離，分別用70%和100%的甲醇洗脫，得到組分C₁和C₂，最后，組分C₂用高效液相色譜分離純化得到純化合物異壁咔啉堿A；

(3) 異壁咔啉堿A的結構鑒定

異壁咔啉堿A的結構是根據它的紫外光譜、紅外光譜、一維和二維核磁共振光譜、高分辨質譜數據和單晶X-射線衍射方法確定；

所述異壁咔啉堿A的化學結構式為：

。

2.根據權利要求1所述的異壁咔啉堿A的制備方法，其特征在于，步驟(2)所述的硅膠柱層析的硅膠用量與上柱的樣品量比例是10-15 g: 1.0 g; 所述的環己烷和乙酸乙酯混合溶劑梯度體積比為10:1，5:1，2:1，1:1，乙酸乙酯和甲醇混合溶劑梯度體積比為5:1，1:1；所述的十八烷基硅烷鍵合硅膠柱層析的ODS用量與上柱的樣品量比例是20-30 g: 1.0 g；所述的高效液相分離條件是：創新通恒CXTH-3000高效液相色譜儀，富士C₁₈ CT-30 色譜柱28030 mm, 10 μm，甲醇和水為流動相, 檢測波長210 nm，流速為10.0 mL/min。

3.權利要求1所述方法制備的異壁咔啉堿A在制備抗膠質瘤藥物中的應用。