[發明專利]富含β-甘露聚糖酶的復合酶的制備及其菌株和應用

有效

• 申請號: 202010511063.9
• 申請日: 2020-06-08
• 公開（公告）號: CN111607581B
• 公開（公告）日: 2023-01-20
• 發明（設計）人: 吳勃;王云龍;徐永雷;王天珍;劉廣曉
• 申請（專利權）人: 杭州保安康生物技術有限公司
• 主分類號: C12N9/24
• 分類號: C12N9/24;C12N9/42;C12N9/50;C12N9/18;C12N9/40;C12N9/88;C12N1/14;A23K20/189;A23K50/75;C12R1/685
• 代理公司: 上海洞鑒知識產權代理事務所(普通合伙) 31346
• 代理人: 劉少偉

1.一種富含β-甘露聚糖酶的復合酶的制備方法，其特征在于，

所用菌株為黑曲霉（Aspergillus niger）BAK200310，保藏號CGMCC No.19616；

培養黑曲霉（Aspergillus niger）BAK200310的發酵產物含有β-甘露聚糖酶、β-葡聚糖酶、酸性蛋白酶、木聚糖酶、果膠酶以及α-半乳糖苷酶。

2.根據權利要求1所述的一種富含β-甘露聚糖酶的復合酶的制備方法，其特征在于，所述復合酶的制備方法包括固體發酵步驟；

將菌懸液接種固體培養基中，培養基初始水分控制在50-60%；曲房相對濕度保持在50%以上，料溫控制在28℃-32℃，培養6-8 d；

所述固體培養基按下述比例配制：麩皮60-70%、豆粕粉10%-20%、棕櫚粕粉20-30%、玉米粉1%-6%、氯化鈣0.5%-1%、硫酸銨0.5%-1%、硫酸鎂0.05%-0.1%、磷酸氫二鉀0.2%-0.3%、初始水分60%-65%。

3.根據權利要求2所述的一種富含β-甘露聚糖酶的復合酶的制備方法，其特征在于，所述固體培養基替換為按下述比例配制：麩皮70-80%、玉米芯粉20%-30%、硫酸銨1-2%、硫酸鎂0.05%-0.1%、碳酸鈣0.5%-1%、磷酸氫二鉀0.2%-0.3%，初始水分60%-65%；

或，

麩皮60-70%、豆粕粉10%-20%、玉米芯粉5%-10%、碳酸鈣1%-2%、氯化銨1-2%、硫酸鎂0.05%-0.1%、硫酸錳0.02%-0.03%、磷酸氫二鉀0.2%-0.3%，初始水分60%-65%。

4.根據權利要求2所述的一種富含β-甘露聚糖酶的復合酶的制備方法，其特征在于，所述菌懸液的制備如下：

（1）菌種活化

將黑曲霉BAK200310接種至經滅菌后的斜面上培養，28-32℃培養6-10 d，其培養基配方為：葡萄糖1-2%、土豆汁20-30%、瓊脂粉1.2-1.8%；

（2）菌種擴培

將步驟（1）中得到的斜面種子接種至二級三角瓶固體培養基中培養；將斜面孢子轉移至150-200 mL無菌水中，震蕩混勻，使孢子充分懸浮于無菌水中；再按2-3 mL/瓶固體種子量接種至二級三角瓶固體培養基上發酵；28-32℃培養4-6 d；培養基配方為：麩皮100%、硫酸銨5%-10%，初始水分45%-55%，每瓶培養基裝量15-20 g；用80-100 mL無菌水/瓶三角瓶種子量將二級三角瓶固體培養基種子制成菌懸液。

5.一種黑曲霉（Aspergillus niger），命名為黑曲霉BAK200310，其保藏號為CGMCCNo.19616。

6.一種畜禽飼料，包括權利要求1-4所述的黑曲霉BAK200310的發酵產物。