[發明專利]一種針對20種人參皂苷的高分辨二級質譜篩查方法

在審

• 申請號: 202010509417.6
• 申請日: 2020-06-05
• 公開（公告）號: CN111896638A
• 公開（公告）日: 2020-11-06
• 發明（設計）人: 韓明;王松;郭英俠;徐德輝;樊杰;隋國奇;閆勝楠
• 申請（專利權）人: 吉林紫鑫藥業股份有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/72
• 代理公司: 吉林長春新紀元專利代理有限責任公司 22100
• 代理人: 魏征驥

1.一種針對20種人參皂苷的高分辨二級質譜篩查方法，其特征在于，包括下列步驟：

(1)、色譜條件與系統適用性試驗

色譜條件：ACQUITY UPLC BEH C18色譜柱，100mm×2.1mm，1.7μm，樣品管理器溫度15℃，柱溫30℃，進樣體積10μL，流速為0.4mL·min-1，流動相A：0.1％甲酸水溶液，v/v；流動相B：0.1％甲酸乙腈溶液，v/v，梯度洗脫條件：0～1min，5～15％B；1～10min，15～35％B；10～14min，35～42％B；14～24min，42～80％B；24～25min，80～95％B；25～26min，95％B；26～27min，95～5％B；27～29min，5％B，

質譜條件：電噴霧離子化源，ESI，Electron Spray Ionization，負離子檢測模式，全掃掃描范圍為m/z 100～1200，毛細管電壓2.2kV(ESI-)，錐孔氣流量為50L·h-1，錐孔電壓為40V，脫溶劑氮氣流量為600L·h-1，脫溶劑氣溫度300℃，源溫120℃，氬氣流量0.15mL·min-1，采用甲酸鈉溶液對儀器進行校正，采用亮氨酸-腦啡肽[M-H]-554.2615作為LockSpray校正標準液(100pg·mL-1)，實時校正的流速為15μL·min-1；

(2)、對照品溶液的制備

取20種人參皂苷對照品適量，加甲醇配置成對照品溶液，結果見表1；

表1 20種人參皂苷對照品信息

(3)、供試品溶液的制備

取干燥樣品粉末、過60目篩，1g，，精密稱定，用20mL 70％甲醇超聲提取，水浴30℃，超聲60min，冷卻后，稱量樣品溶液，用70％甲醇補足損失的重量，3000rpm，離心10min，上清液過0.2μm的濾膜，取續濾液，備用；

(4)、質譜庫的建立：

以上述基質標準品為樣品，應用LC-MS-QTOF質譜采集條件，調節液相條件為乙腈與水的流速分別為0.15mL/min，采用等度洗脫方法，通過自動進樣器采樣，不接色譜柱，改用兩通，采集時間2min，分別選取有代表性，具有豐富的離子碎片信息的質譜圖，分別建立并儲存碰撞能為20，35，50和35±15eV時的全掃描質譜圖至質譜譜庫，同時描述人參皂苷的名稱，精確分子質量、結構式、采集條件、常規保留時間，見表2；

表2人參皂苷的質譜碎片及參數