[發(fā)明專利]耐乙酸乳桿菌特異性檢測(cè)探針、試劑盒和應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010484890.3
• 申請(qǐng)日: 2020-06-01
• 公開（公告）號(hào): CN112226523B
• 公開（公告）日: 2022-11-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 羅娜;欒春光;涂京霞;孫義玄;曹偉華;劉靜;郝建秦;王德良
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 廣州南沙珠江啤酒有限公司;中國食品發(fā)酵工業(yè)研究院有限公司
• 主分類號(hào): C12Q1/689
• 分類號(hào): C12Q1/689;C12Q1/6851;C12Q1/06;C12N15/11;C12R1/225
• 代理公司: 廣州新諾專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 44100
• 代理人: 李德魁

1.一種耐乙酸乳桿菌特異性檢測(cè)引物，其特征在于，所述檢測(cè)引物針對(duì)AP014808.1:1564884-1565303設(shè)計(jì)，所述檢測(cè)引物的序列如下所示：

F：5’- CCAGCCTTCAAGGTGGTTGTCT -3’（SEQ ID No.2），

R：5’- CGATTGAAAGTTGGTCAATCAGGACT -3’（SEQ ID No.3）。

2.一種耐乙酸乳桿菌的檢測(cè)方法，其特征在于，包括以下步驟：

1）提取樣本DNA；

2）向步驟1）中的樣本DNA中加入權(quán)利要求1所述的特異性檢測(cè)引物、2×Mix PCR預(yù)混液和水；樣本DNA的終濃度是0.025ng/μL，上游引物終濃度為200nM，下游引物終濃度為200nM，PCR預(yù)混液的終濃度為1×Mix；

3）進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR反應(yīng)；實(shí)時(shí)熒光定量PCR反應(yīng)的條件為：

變性：95℃預(yù)變性5min；

循環(huán)：95℃，15s；60℃，30s，30個(gè)循環(huán)；

雙重退火：95℃，15s；60℃，15s；95℃，30s；60℃，15s；

保溫：60℃，7min。

3.一種耐乙酸乳桿菌特異性檢測(cè)試劑盒，其特征在于，包括權(quán)利要求1所述的特異性檢測(cè)引物。

4.一種如權(quán)利要求3所述的耐乙酸乳桿菌特異性檢測(cè)試劑盒在檢測(cè)啤酒中耐乙酸乳桿菌中的應(yīng)用。