[發明專利]超高效液相色譜串聯質譜檢測血漿中抗動脈粥樣硬化藥物的試劑盒

在審

• 申請號: 202010476327.1
• 申請日: 2020-05-29
• 公開（公告）號: CN111579683A
• 公開（公告）日: 2020-08-25
• 發明（設計）人: 成曉亮;李美娟
• 申請（專利權）人: 南京品生醫療科技有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 黃欣

本發明公開了一種超高效液相色譜串聯質譜技術檢測血漿中抗動脈粥樣硬化藥物的試劑盒，屬于血漿檢測技術領域。針對常用的抗動脈粥樣硬化藥物，阿托伐他汀、鄰羥基阿托伐他汀、對羥基阿托伐他汀、瑞舒伐他汀和地高辛，本發明的試劑盒采用LC?MS/MS法，可以一次性對其進行檢測，目標藥物與代謝產物同時監測，靈敏度高、準確性好，可很好應用于臨床，為血漿抗動脈粥樣硬化藥物聯合用藥研究提供可靠依據。

技術領域

本發明屬于藥物檢測技術領域，具體涉及一種利用超高效液相色譜串聯質譜技術檢測血漿中抗動脈粥樣硬化藥物的試劑盒。

背景技術

根據中國心血管疾病報告報告，心血管疾病(CVD)是中國居民疾病死亡的主要原因。高血壓和高脂血癥通常并存，是心血管疾病進展和發展的基礎。高脂血癥是動脈粥樣硬化進展的主要危險因素，動脈粥樣硬化又會導致一些心血管并發癥，如冠心病、缺血性腦血管疾病、外周血管疾病、缺血性腦血管疾病和外周血管疾病。高脂血癥是指包括脂肪、脂肪酸、膽固醇、膽固醇酯、磷脂和甘油三酸酯在內的脂質在血液中的升高，控制高脂血癥對于預防動脈粥樣硬化及其相關疾病很重要。

3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A(HMG–CoA)還原酶抑制劑，也就是他汀類藥物，是最有效、耐受性最好、應用最廣泛的降脂藥物，被認為是高脂血癥的一線治療藥物。其中，阿托伐他汀(ATO)是有效的3-羥基-3-甲基戊二烯基(HMG)-CoA還原酶的合成抑制劑，可降低總膽固醇和血漿甘油三酸酯；而對羥基阿托伐他汀(p-HATT)和鄰羥基阿托伐他汀(o-HATT)是阿托伐他汀在體內經過肝藥酶代謝，得到的兩種活性代謝產物。這三種他汀類藥物是目前最常用的降膽固醇藥物，由于其高療效和安全性，已在許多國家廣泛用于治療高脂血癥。在全球范圍內，阿托伐他汀(ATV)鈣(紐約輝瑞制藥公司的)是最暢銷的處方藥。

在他汀類藥物中，瑞舒伐他汀(ROS)為新型降血脂藥，于2003年8月在美國批準用于治療血脂異常，廣泛應用于治療高膽固醇血癥和預防冠狀動脈疾病。由于其獨特的特性，例如選擇性攝入肝細胞、優異的結合親和力和在酶活性位點的緊密結合相互作用，它對膽固醇和甘油三酯的降低作用最大，是最有效和有效的他汀類藥物之一。

然而，相當一部分接受他汀類藥物治療的患者未能達到目標。造成這種失敗的原因包括患者依從性差、藥物反應的變異性以及他汀類藥物劑量方面問題。由于他汀類藥物單一療法的局限性，所以會聯合地高辛聯合治療，進一步降低血脂水平。地高辛是一種廣泛用于治療充血性心力衰竭的強心苷，其藥用用途1785年被Withering首次提出，但是其治療范圍較窄(0.8-2.0ng/mL)，增加了地高辛使用的復雜性，因此，地高辛藥代動力學的微小變化可能導致治療效果下降或潛在的嚴重毒性。

目前現有技術已經有針對血漿抗動脈粥樣硬化藥物體內濃度檢測的報道，比如中國專利CN107102079A公開了一種檢測人血漿中阿托伐他汀及代謝物的液相色譜-串聯質譜方法及臨床藥學研究應用，可以同時檢測3種藥物，樣本量需要100μL，且需要氮吹濃縮，前處理復雜；此外還有文獻報告針對其中一種或幾種他汀類藥物進行檢測，但是效率相對比較低，存在單個樣品分析時間長、靈敏度低、線性范圍不適宜、樣品前處理復雜和進樣量大，基質效應干擾等不足。

發明內容

針對上述現有技術的不足，本發明提供了一種超高效液相色譜串聯質譜技術檢測血漿中抗動脈粥樣硬化藥物的試劑盒及其應用。

為了實現上述發明目的，本發明采用以下技術方案：

一種檢測血漿中抗動脈粥樣硬化藥物的試劑盒，包括：液相色譜流動相、校準品溶液、混合內標溶液、質控品和蛋白質沉淀劑；

所述抗動脈粥樣硬化藥物包括阿托伐他汀、鄰羥基阿托伐他汀、對羥基阿托伐他汀、瑞舒伐他汀和地高辛；

所述液相色譜流動相包括流動相A和流動相B，流動相A為甲酸-甲酸銨水溶液，流動相B為乙腈；