[發明專利]一種用于免疫功能調節的間充質干細胞藥物及制備方法

在審

• 申請號: 202010470634.9
• 申請日: 2020-05-28
• 公開（公告）號: CN111603482A
• 公開（公告）日: 2020-09-01
• 發明（設計）人: 高連如;張寧坤
• 申請（專利權）人: 高連如
• 主分類號: A61K35/28
• 分類號: A61K35/28;A61K9/08;A61K47/42;A61P37/02;A61P29/00;C12N5/0775
• 代理公司: 北京豐浩知識產權代理事務所(普通合伙) 11781
• 代理人: 李學康

本發明公開一種用于免疫功能調節的間充質干細胞藥物，其含有臍帶疏松結締組織間充質干細胞LCMSCs，所述LCMSCs為從新生兒臍帶內胎兒與母體連接界面的疏松結締組織中提取未分化的原始間充質干細胞，所述LCMSCs是胚外中胚層來源的原始未分化的間充質干細胞。LCMSCs最大限度地保存了原始MSCs生物學特性，其歸巢遷移、分化增殖潛力遠較成體來源MSCs更強，集落形成單位是骨髓源MSCs的300倍，分泌的生長因子、營養因子最豐富，分泌的肝細胞生長因子是BMSCs的31.3倍，能突出表達多種抑癌基因，體外與多種腫瘤細胞共培養無腫瘤細胞分化，無體內成纖維瘤樣分化，可高表達免疫調節因子HGF、TSG?6、PGE2、MCP1、VEGFA、IL?6、IL?10、IDO、TGF?β、sVCAM1等，純度遠優于成體及臍帶、胎盤、羊膜等來源的MSCs，安全性高。

技術領域

本發明涉及生物工程技術領域，具體涉及一種用于免疫功能調節的間充質干細胞藥物及制備方法。

背景技術

當前缺血性心臟病、腦卒中、糖尿病、多種免疫性疾病及退行病等發病率、致殘率、死亡率仍居高不下。新冠肺炎(COVID-2019)所致的嚴重肺損傷導致呼吸衰竭(ARDS)已奪去了數以萬計人的生命。這是因為目前醫學領域還缺乏針對上述疾病的特異有效且副作用小的治療手段。上述疾病對現代醫學提出了巨大的挑戰。

近年來，大量科學證據表明，具有多向分化及自我更新的間充質干細胞(MSCs)通過其旁/自分泌效應，發揮著免疫調節、抗炎癥、再生血管、修復組織等作用，在冠心病、心肌梗死、心力衰竭、腦卒中、老年癡呆、多種自身免疫性疾病、骨關節疾病等的臨床硏究中已顯示了良好的效果與前景。尤其是，在近期COVID-2019疫情中，面對細胞因子風暴所致的大面積肺損傷壞死滲出，激素應用受到一定限制的情況下，具有獨特免疫調節功能的MSCs發揮了重要的抗炎癥、抑制過度免疫應激、修復肺組織、恢復肺表面活性物質等，起到了重要作用。

然而，大量科學研究證據表明，不同組織來源的MSCs(mesenchymal stem cells)其生物學特性與功能存在顯著差異。如成體組織來源的MSCs增殖能力及分化潛能會隨年齡增長和疾病內環境影響而下降。尤其值得注意的是，還有研究報道，在體內外研究中發現成體組織來源的MSCs在一定條件下可分化為成纖維瘤樣細胞。

近來一些研究者從新生兒臍帶、臍血、胎盤、羊膜等組織中分離出異體來源的MSCs，但發現臍血中MSCs含量少，而從臍帶、胎盤、羊膜分離的MSCs中混入的其它雜質細胞高達50-70％左右，嚴重影響了MSCs的歸巢、增殖、旁/自分泌功能、及治療效果與安全性。因此，如何制備既具原始特性又具有較高純度的MSCs，對適應臨床硏究與應用需求顯得十分重要。

發明內容

(一)要解決的技術問題

為了解決現有技術的上述問題，本發明提供一種用于免疫功能調節的間充質干細胞藥物，其所含的間充質干細胞為從新生兒臍帶內胎兒與母體連接界面的疏松結締組織中提取的未分化的原始間充質干細胞LCMSCs(loose connective mesenchymal stemcells)。該原始間充質干細胞LCMSCs最大限度地保存了原始MSCs生物學特性，具有高表達多種抑癌基因、無向瘤細胞分化風險、安全可靠的優點。

本發明還包括間充質干細胞藥物的制備方法，具體為先提取內胎兒與母體連接界面的疏松結締組織，對該疏松結締組織采用連貫階梯式培養法，獲得未分化的原始間充質干細胞LCMSCs，以該原始間充質干細胞LCMSCs制備成免疫調節藥物，如注射液等。

(二)技術方案

為了達到上述目的，本發明采用的主要技術方案包括：