[發(fā)明專利]一種脫毒馬鈴薯試管培育的方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010464948.8
• 申請(qǐng)日: 2020-05-28
• 公開（公告）號(hào): CN111480580A
• 公開（公告）日: 2020-08-04
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 嚴(yán)柯雯;顧碧婷;張志樣;楊國(guó)榮;劉宏中;林佳;謝玲;徐靜霞;譚曉菁;王芳;魯宇文;葛體達(dá);嚴(yán)成其
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 嚴(yán)柯雯
• 主分類號(hào): A01H4/00
• 分類號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 深圳市中原力和專利商標(biāo)事務(wù)所(普通合伙) 44289
• 代理人: 胡國(guó)良

本發(fā)明公開一種脫毒馬鈴薯試管培育的方法，包括如下步驟：步驟S1、馬鈴薯試管苗的誘導(dǎo)；步驟S2、馬鈴薯試管苗的培育；步驟S3、馬鈴薯試管苗的病毒鑒定；步驟S4、脫毒馬鈴薯試管苗壯苗培育；步驟S5、試管薯的誘導(dǎo)；步驟S6、待60～70天后收獲脫毒試管薯。本發(fā)明通過(guò)設(shè)置液體培養(yǎng)基促進(jìn)馬鈴薯試管苗的生長(zhǎng)，有效節(jié)約生產(chǎn)成本，再通過(guò)光照以誘導(dǎo)馬鈴薯試管苗形成馬鈴薯試管薯，一方面提高了馬鈴薯試管苗的成薯指數(shù)、薯塊重量、大薯率、最大薯重和薯塊直徑，另一方面有效改善馬鈴薯產(chǎn)量品質(zhì)低的問(wèn)題，有利于實(shí)現(xiàn)馬鈴薯的自動(dòng)化大規(guī)模生產(chǎn)。

【技術(shù)領(lǐng)域】

本發(fā)明涉及馬鈴薯培育領(lǐng)域，特別地，涉及一種脫毒馬鈴薯試管培育的方法。

【背景技術(shù)】

馬鈴薯是世界上僅次于水稻、玉米小麥的第四大糧食作物，廣泛分布于世界各地。在生產(chǎn)過(guò)程中，由于病毒的侵染，馬鈴薯容易出現(xiàn)生長(zhǎng)勢(shì)衰退、薯塊變小或畸形等一系列的退化現(xiàn)象，導(dǎo)致其產(chǎn)量及質(zhì)量的下降，嚴(yán)重影響馬鈴薯的生產(chǎn)，可靠的繁種技術(shù)是確保馬鈴薯高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)的基礎(chǔ)，傳統(tǒng)的繁種技術(shù)容易使病毒在種薯中世代積累和傳遞，導(dǎo)致馬鈴薯種性退化，造成馬鈴薯減產(chǎn)，減產(chǎn)幅度在20％～50％之間。

脫毒試管薯技術(shù)能有效解除病毒侵染的制約，以該技術(shù)為核心構(gòu)建種薯工廠化生產(chǎn)的現(xiàn)代繁種工業(yè)體系，能實(shí)現(xiàn)周年穩(wěn)定的規(guī)模產(chǎn)出，為種植業(yè)提供優(yōu)質(zhì)脫毒種薯，通過(guò)采用馬鈴薯莖尖脫毒，脫毒苗快繁生產(chǎn)小種薯是解決馬鈴薯病毒侵染和品種退化以提高產(chǎn)量和品質(zhì)的最好途徑。

試管薯是馬鈴薯試管苗在培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)合適條件下從腋芽中誘導(dǎo)出產(chǎn)生的2-10mm小種薯，具有重量輕，體積小，易儲(chǔ)存，繁殖速度高于常規(guī)田間生產(chǎn)，不受季節(jié)限制，栽培成活高突出優(yōu)點(diǎn)，此外，試管薯也是研究馬鈴薯碳水化合物代謝的一個(gè)適宜模式，同時(shí)它還是進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化的良好受體。試管薯的誘導(dǎo)是受“基因型－環(huán)境－生物化學(xué)因子”相互作用、共同調(diào)節(jié)的復(fù)雜過(guò)程。基因型的差異是影響試管薯誘導(dǎo)的主要因素之一。在相同的誘導(dǎo)條件下，早熟品種的試管苗結(jié)薯能力強(qiáng)于晚熟品種。溫度對(duì)試管薯的誘導(dǎo)有一定的影響，晝夜變溫環(huán)境條件下，試管薯誘導(dǎo)率較高其中，光照也是影響馬鈴薯試管薯形成的主要原因，但是，目前相關(guān)文獻(xiàn)中僅記載了試管薯的誘導(dǎo)及生長(zhǎng)需要在黑暗條件下完成，如何通過(guò)光照和其他因素來(lái)提高脫毒馬鈴薯試管苗在瓶?jī)?nèi)誘導(dǎo)生長(zhǎng)成試管薯的結(jié)薯率并未見相關(guān)文獻(xiàn)研究。

鑒于此，有必要提供一種改進(jìn)的脫毒馬鈴薯試管培育的方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

本發(fā)明的目的在于提供一種脫毒馬鈴薯試管培育的方法，以解決上述背景技術(shù)中出提出的問(wèn)題。

為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用了如下技術(shù)方案：一種脫毒馬鈴薯試管培育方法，包括如下步驟：

步驟S1、馬鈴薯試管苗的誘導(dǎo)：對(duì)馬鈴薯進(jìn)行催芽處理，當(dāng)馬鈴薯苗芽生長(zhǎng)到3-5cm時(shí)，對(duì)苗芽采用流水沖洗，然后再對(duì)苗芽用70～80％酒精消毒處理20S～40S以去除酯質(zhì)，去除酯質(zhì)后使用0.2％氯化汞處理6～8分鐘并用無(wú)菌水沖洗沖洗4～5遍，將沖洗后的苗芽切取0.2～0.4mm的馬鈴薯莖尖，將其接種到MS培養(yǎng)基，并對(duì)其光照處理后誘導(dǎo)出馬鈴薯試管苗；

步驟S2、馬鈴薯試管苗的培育：將誘導(dǎo)出的馬鈴薯試管苗在生長(zhǎng)到5-6cm時(shí)移栽到添加了6-BA和IAA的MS培養(yǎng)基培育，其中6-BA的濃度為0.01～0.2mg/L，IAA的濃度為0.01～0.15mg/L；

步驟S3、馬鈴薯試管苗的病毒鑒定：采用多重RT-PCR檢測(cè)技術(shù)對(duì)誘導(dǎo)出的馬鈴薯試管苗進(jìn)行檢測(cè)，并篩選出脫毒馬鈴薯試管苗；

步驟S4、脫毒馬鈴薯試管苗壯苗培育：將不含瓊脂的MS無(wú)菌液體培養(yǎng)基加入到無(wú)菌培養(yǎng)瓶中，并在無(wú)菌培養(yǎng)瓶中接種3-5cm長(zhǎng)的脫毒馬鈴薯試管苗莖段，得到脫毒馬鈴薯試管苗壯苗；