[發明專利]一種脫毒馬鈴薯試管培育的方法

在審

• 申請號: 202010464948.8
• 申請日: 2020-05-28
• 公開（公告）號: CN111480580A
• 公開（公告）日: 2020-08-04
• 發明（設計）人: 嚴柯雯;顧碧婷;張志樣;楊國榮;劉宏中;林佳;謝玲;徐靜霞;譚曉菁;王芳;魯宇文;葛體達;嚴成其
• 申請（專利權）人: 嚴柯雯
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 深圳市中原力和專利商標事務所(普通合伙) 44289
• 代理人: 胡國良

1.一種脫毒馬鈴薯試管培育的方法，其特征在于，包括如下步驟：

步驟S1、馬鈴薯試管苗的誘導：對馬鈴薯進行催芽處理，當馬鈴薯苗芽生長到3-5cm時，對苗芽采用流水沖洗，然后再對苗芽用70～80％酒精消毒處理20S～40S以去除酯質，去除酯質后使用0.2％氯化汞處理6～8分鐘并用無菌水沖洗沖洗4～5遍，將沖洗后的苗芽切取0.2～0.4mm的馬鈴薯莖尖，將其接種到MS培養基，并對其光照處理后誘導出馬鈴薯試管苗；

步驟S2、馬鈴薯試管苗的培育：將誘導出的馬鈴薯試管苗在生長到5-6cm時移栽到添加了6-BA和IAA的MS培養基培育，其中6-BA的濃度為0.01～0.2mg/L，IAA的濃度為0.01～0.15mg/L；

步驟S3、馬鈴薯試管苗的病毒鑒定：采用多重RT-PCR檢測技術對誘導出的馬鈴薯試管苗進行檢測，并篩選出脫毒馬鈴薯試管苗；

步驟S4、脫毒馬鈴薯試管苗壯苗培育：將不含瓊脂的MS無菌液體培養基加入到無菌培養瓶中，并在無菌培養瓶中接種3-5cm長的脫毒馬鈴薯試管苗莖段，得到脫毒馬鈴薯試管苗壯苗；

步驟S5、試管薯的誘導：將脫毒馬鈴薯試管苗壯苗切成含有一芽一葉的莖段，然后將其接種到添加了蔗糖、活性炭和香豆素的MS培養基上并在適當光照下進行培育，其中蔗糖的濃度為70～90g/L，活性炭的濃度為0.8～1.2g/L，香豆素的濃度為10～30mg/L，光照時間4～12h/d，光照強度2000～2500Lx；

步驟S6、待60～70天后收獲脫毒試管薯。

2.根據權利要求1所述的脫毒馬鈴薯試管培育的方法，其特征在于，在步驟S1中，光照處理的光照強度為2000lx，光照時間12h/d。

3.根據權利要求1所述的脫毒馬鈴薯試管培育的方法，其特征在于，在步驟S1中，MS培養基的PH值設置為5.5～6.0，其所處環境溫度為25±1℃。

4.根據權利要求1所述的脫毒馬鈴薯試管培育的方法，其特征在于，在步驟S1中，在超靜工作臺上對苗芽去除酯質。

5.根據權利要求1所述的脫毒馬鈴薯試管培育的方法，其特征在于，在步驟S1中，采用解剖刀切取馬鈴薯莖尖。

6.根據權利要求1所述的脫毒馬鈴薯試管培育的方法，其特征在于，在步驟S3中，進行病毒測試的馬鈴薯試管苗為5-6cm。

7.根據權利要求1所述的脫毒馬鈴薯試管培育的方法，其特征在于，在步驟S5中，MS培養基的PH值設置為5.5～6.0，其所處環境溫度為25±3℃。