[發明專利]一組早期食管鱗狀細胞癌篩查標志物及其在探針試劑盒中的應用

在審

• 申請號: 202010464184.2
• 申請日: 2020-05-27
• 公開（公告）號: CN111394470A
• 公開（公告）日: 2020-07-10
• 發明（設計）人: 王立東;李欣然;趙學科;宋昕;雷玲玲;周福有;王偉;李恩民;李秀敏;高社干;秦艷茹;郭海周
• 申請（專利權）人: 鄭州大學第一附屬醫院;安陽市腫瘤醫院;汕頭大學醫學院;新鄉醫學院;河南科技大學第一附屬醫院
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;C12Q1/6851
• 代理公司: 鄭州翊博專利代理事務所(普通合伙) 41155
• 代理人: 涂連梅

本發明屬于生物工程及生物醫藥技術領域，具體涉及腫瘤學領域，更具體涉及一組早期食管鱗狀細胞癌篩查標志物及其在引物探針試劑盒中的應用。本發明提供了檢測SLAMF1、CRIM、CCSER1、MGARP、POMK基因的引物組合物和探針組合物，并利用該引物組合物和探針組合物制備檢測早期食管鱗狀細胞癌的試劑盒。利用本發明試劑盒對早期食管鱗狀細胞癌的檢測敏感度達82.11%，特異度達86.99%，適用于對食管鱗狀細胞癌高發區無癥狀人群進行早期食管鱗狀細胞癌的大規模篩查。

技術領域

本發明屬于生物工程及生物醫藥技術領域，具體涉及腫瘤學領域，更具體涉及一組早期食管鱗狀細胞癌篩查標志物及其在引物探針試劑盒中的應用。

背景技術

食管鱗狀細胞癌是全球最常見的惡性腫瘤之一，死亡率位居第六位，全球每年新發約50萬例食管鱗狀細胞癌患者中一半以上發生在中國，比西方國家發病率高100倍。與西方人群顯著不同，中國人食管鱗狀細胞癌突出的流行病學特征是顯著的地域性分布差異和明顯的家族聚集性。河南、河北和山西三省交界的太行山區，河南林州是國內也是世界上食管鱗狀細胞癌發病率和死亡率最高的地區。中西方食管鱗狀細胞癌的組織學類型和流行性特征明顯不同導致中西方學者關注的科學問題和研究思路明顯不同，研究成果相互借鑒和共享困難。食管鱗狀細胞癌預后極差，中晚期食管鱗狀細胞癌患者5年生存率僅15%左右，而早期食管鱗狀細胞癌患者的5年生存率為90%左右。盡管早期食管鱗狀細胞癌5年生存率明顯高于中晚期，但臨床上首次確診的患者中，早期癌僅占5%左右。因此提高早期食管鱗狀細胞癌的診斷率極其重要。由于食管鱗狀細胞癌患者在早期階段缺乏明顯的特異癥狀，并且缺乏適宜大范圍高危人群篩查的經濟、高效和敏感的生物標志物，導致目前臨床上就診的食管鱗狀細胞癌患者在確診時多已為中晚期階段。目前，色素內鏡和粘膜活檢病理檢查是食管鱗狀細胞癌早期發現的重要篩查方法。但是，因內鏡篩查有創傷，且成本高，效率低，限制了內鏡篩查在無癥狀人群食管鱗狀細胞癌早發現中的推廣。食管鱗狀細胞癌早期發現，是提高食管鱗狀細胞癌患者生存率的有效手段，因此篩選高效、特異的食管鱗狀細胞癌分子標志物對于食管鱗狀細胞癌患者的早期發現、早期篩查尤為重要，也是亟待解決的問題。

發明人所在研究機構35年來搜集了30余萬例食管鱗狀細胞癌患者相關信息，利用分子機制篩選食管鱗狀細胞癌特異標志物，建立高危人群和食管鱗狀細胞癌早期發現的分子標志物篩查體系，并在此基礎上進行分子標志物篩選，通過發明人所在研究機構近期開展的全外顯子組測序（wholeexomesequencing,WES）有關研究，將700余例食管鱗狀細胞癌患者以及健康志愿者進行全基因組外顯子區域DNA捕獲富集后進行高通量測序，發現數種與食管鱗狀細胞癌的發生相關的基因，并將這些基因在食管鱗狀細胞癌高發區8000余例無癥狀人群中進行驗證，最終篩選出了可用于高危人群早期食管鱗狀細胞癌篩查的五個基因標志物，這五種基因標志物為SLAMF1、CRIM、CCSER1、MGARP和POMK基因，這五種針對食管鱗狀細胞癌早期病變有關的基因作為早期診斷指標，對于提高早期食管鱗狀細胞癌的發現率，降低食管鱗狀細胞癌的死亡率具有重要意義。此外，本發明將篩選出的早期食管鱗狀細胞癌分子標志物制成試劑盒，應用于高危人群早期食管鱗狀細胞癌的篩查，可以提高早期食管鱗狀細胞癌的發現率。因此，開發一種便于對高危人群進行患食管鱗狀細胞癌風險檢測的試劑盒具有重要意義。

發明內容

本發明的目的在于提供一組早期食管鱗狀細胞癌篩查標志物及其在探針試劑盒中的應用。

基于上述目的，本發明采用如下技術方案：

本發明提供了一組可以有效區分早期食管鱗狀細胞癌的分子標志物，該分子標志物包括SLAMF1、CRIM、CCSER1、MGARP、POMK基因。

本發明還提供了一種上述分子標志物的檢測試劑在制備早期食管鱗狀細胞癌篩查試劑盒中的應用。

根據上述應用，優選地，檢測試劑包括檢測SLAMF1、CRIM、CCSER1、MGARP、POMK基因的引物組合物和探針組合物。