[發(fā)明專利]一組早期食管鱗狀細(xì)胞癌篩查標(biāo)志物及其在探針試劑盒中的應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010464184.2
• 申請日: 2020-05-27
• 公開（公告）號: CN111394470A
• 公開（公告）日: 2020-07-10
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王立東;李欣然;趙學(xué)科;宋昕;雷玲玲;周福有;王偉;李恩民;李秀敏;高社干;秦艷茹;郭海周
• 申請（專利權(quán)）人: 鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院;安陽市腫瘤醫(yī)院;汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院;新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院;河南科技大學(xué)第一附屬醫(yī)院
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;C12Q1/6851
• 代理公司: 鄭州翊博專利代理事務(wù)所(普通合伙) 41155
• 代理人: 涂連梅

1.檢測SLAMF1、CRIM、CCSER1、MGARP、POMK基因的試劑在制備早期食管鱗狀細(xì)胞癌篩查試劑盒中的應(yīng)用。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述檢測SLAMF1、CRIM、CCSER1、MGARP、POMK基因的試劑為檢測SLAMF1、CRIM、CCSER1、MGARP、POMK基因的引物組合物和探針組合物。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于，所述引物組合物由用于檢測SLAMF1基因的SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列、用于檢測CRIM基因的SEQ ID NO.3和SEQID NO.4所示的核苷酸序列、用于檢測CCSER1基因的SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示的核苷酸序列、用于檢測MGARP基因的SEQ ID NO.7和SEQ ID NO.8所示的核苷酸序列、用于檢測POMK基因的SEQ ID NO.9和SEQ ID NO.10所示的核苷酸序列組成；

所述探針組合物由SEQ ID NO.11、SEQ ID NO.12、SEQ ID NO.13、SEQ ID NO.14、SEQID NO.15所示的核苷酸序列組成。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于，所述探針組合物中各個探針的核苷酸序列的5’端修飾有FAM熒光基因，3’端修飾有MGB非熒光淬滅基團(tuán)。

5.檢測SLAMF1、CRIM、CCSER1、MGARP、POMK基因的引物組合物和探針組合物在制備早期食管鱗狀細(xì)胞癌篩查試劑盒中的應(yīng)用。

6.一種用于檢測早期食管鱗狀細(xì)胞癌的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒中包含SLAMF1、CRIM、CCSER1、MGARP、POMK基因的檢測試劑。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的檢測早期食管鱗狀細(xì)胞癌的試劑盒，其特征在于，所述檢測試劑為檢測SLAMF1、CRIM、CCSER1、MGARP、POMK基因的引物組合物和探針組合物。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的檢測早期食管鱗狀細(xì)胞癌的試劑盒，其特征在于，所述引物組合物由用于檢測SLAMF1基因的SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列、用于檢測CRIM基因的SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示的核苷酸序列、用于檢測CCSER1基因的SEQ IDNO.5和SEQ ID NO.6所示的核苷酸序列、用于檢測MGARP基因的SEQ ID NO.7和SEQ ID NO.8所示的核苷酸序列、用于檢測POMK基因的SEQ ID NO.9和SEQ ID NO.10所示的核苷酸序列組成；

所述探針組合物由SEQ ID NO.11、SEQ ID NO.12、SEQ ID NO.13、SEQ ID NO.14、SEQID NO.15所示的核苷酸序列組成，所述探針組合物中各個探針的核苷酸序列的5’端修飾有FAM熒光基因，3’端修飾有MGB非熒光淬滅基團(tuán)。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的檢測早期食管鱗狀細(xì)胞癌的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒中含有SLAMF1、CRIM、CCSER1、MGARP、POMK基因?qū)?yīng)的標(biāo)準(zhǔn)cDNA。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所說的檢測早期食管鱗狀細(xì)胞癌的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒的檢測對象為食管組織；所述試劑盒的使用方法包括以下步驟：

（1）對食管組織樣本進(jìn)行RNA提??；

（2）對提取的組織樣本RNA進(jìn)行質(zhì)量分析；

（3）利用提取的組織樣本RNA逆轉(zhuǎn)錄合成樣本cDNA；

（4）配制qRT-PCR反應(yīng)體系；

（5）進(jìn)行實時熒光定量PCR擴(kuò)增反應(yīng)，根據(jù)熒光PCR儀的擴(kuò)增結(jié)果參照標(biāo)準(zhǔn)cDNA的擴(kuò)增結(jié)果，對組織樣本是否檢測到SLAMF1、CRIM、CCSER1、MGARP、POMK基因進(jìn)行判斷。