[發(fā)明專利]一種檢測葉片病原真菌的染色方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202010463836.0 | 申請日： | 2020-05-27 |
| 公開（公告）號： | CN111521472A | 公開（公告）日： | 2020-08-11 |
| 發(fā)明（設計）人： | 王萌;梁曉宇;龍明騰;張宇 | 申請（專利權）人： | 海南大學 |
| 主分類號： | G01N1/30 | 分類號： | G01N1/30;G01N1/28;G01N1/34;G01N1/31;G01N21/84 |
| 代理公司： | 北京科億知識產(chǎn)權代理事務所(普通合伙) 11350 | 代理人： | 趙蕊紅 |
| 地址： | 570228 海*** | 國省代碼： | 海南;46 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 檢測 葉片 病原 真菌 染色 方法 | ||
1.一種檢測葉片病原真菌的染色方法，其特征在于，它包括以下步驟：
S1.前處理：選擇被病原真菌侵染的葉片作為處理材料，剪成塊狀；
S2.固定脫色：將塊狀樣品浸泡在脫色液中進行脫色，所述脫色液為三氯乙酸、乙醇與氯仿的混合溶液，脫色時間為10～15h；
S3.真空抽濾：將固定脫色好的樣品進行真空抽濾，抽濾至葉片不懸浮于染色劑表面；
S4.染色：將抽濾后的樣品浸泡在剛果紅染色劑中常溫避光放置2～4h；
S5.制片觀察：染色處理后的樣品直接用蒸餾水沖洗脫色，制片鏡檢。
2.根據(jù)權利要求1所述的一種檢測葉片病原真菌的染色方法，其特征在于：所述病原真菌為炭疽病菌。
3.根據(jù)權利要求1所述的一種檢測葉片病原真菌的染色方法，其特征在于：所述病原真菌為麻點病菌。
4.根據(jù)權利要求2或3所述的一種檢測葉片病原真菌的染色方法，其特征在于：所述病原真菌來源于橡膠樹。
5.根據(jù)權利要求1所述的一種檢測葉片病原真菌的染色方法，其特征在于：步驟S1中所述塊狀的大小為1.5cm×1.5cm。
6.根據(jù)權利要求1所述的一種檢測葉片病原真菌的染色方法，其特征在于：步驟S2所述固定脫色液中的三氯乙酸醇溶液與氯仿的體積比為4～6:1，其中三氯乙酸醇溶液的質量體積比為0.15％。
7.根據(jù)權利要求1所述的一種檢測葉片病原真菌的染色方法，其特征在于：步驟S3中所述真空抽濾是在0.09MPa下抽濾5～15min。
8.根據(jù)權利要求1所述的一種檢測葉片病原真菌的染色方法，其特征在于：步驟S4中所述剛果紅的質量體積比為1％。
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