[發明專利]針對新型冠狀病毒的抗體

有效

• 申請號: 202010463582.2
• 申請日: 2020-05-27
• 公開（公告）號: CN112979791B
• 公開（公告）日: 2021-12-10
• 發明（設計）人: 張黎;朱鳳才;鄭濱洋;高行素
• 申請（專利權）人: 江蘇省疾病預防控制中心（江蘇省公共衛生研究院）
• 主分類號: C07K16/10
• 分類號: C07K16/10;C12N15/13;G01N33/569
• 代理公司: 北京預立生科知識產權代理有限公司 11736
• 代理人: 朱萍;孟祥斌

本發明公開了針對新型冠狀病毒的抗體。本發明還涉及編碼抗體的核酸分子以及使用這些抗體進行診斷的方法。

技術領域

本發明屬于細胞免疫學、分子生物學領域，涉及針對新型冠狀病毒的抗體。

背景技術

國際病毒分類委員會將新型冠狀病毒命名為SARS-CoV-2，世界衛生組織將感染此病毒引起的肺炎稱為COVID-19。此病毒傳染性強，傳播途徑廣。該病毒能迅速適應人體環境，感染后在潛伏期即具有傳播能力，同時還有一些無癥狀感染者報道，甚至在多種動物體內也檢測到病毒核酸。這些因素使得對該病毒的防控變的非常復雜，而且目前沒有有效治療藥物及疫苗上市。SARS-CoV-2屬于冠狀病毒屬，為單股正鏈RNA病毒，大小約30kb，與SARS-CoV相似性為79％，與蝙蝠體內分離的冠狀病毒(Coronavirus，CoV)相似性最高約88％。SARS-CoV-2具有典型的冠狀病毒特征，病毒包膜上有典型的棘突，形似日冕。核衣殼為螺旋對稱型，主要結構蛋白是核衣殼蛋白(Nucleocapsid protein,NP)，NP全長420個氨基酸。NP在病毒結構蛋白中含量最多，在宿主感染早期大量表達，且免疫原性較強，能引起宿主強烈的免疫應答。因此，NP可作為SARS-CoV-2感染血清學診斷的主要靶標抗原。

由于特異性治療藥物及有效疫苗尚未研發成功，早期診斷成為防控疫情重要的措施，早期核酸診斷及臨床診斷為確診重要依據。雖然核酸診斷速度快，受采樣的質量的影響大，存在假陽性和假陰性，影響防控措施的落實。部分無癥狀感染者在病程晚期核酸檢測也呈陰性，單憑核酸檢測很容易出現漏診。血清學診斷是檢測病原感染后機體的免疫反應，持續時間長，免疫反應穩定，且免疫反應隨著病程進展呈動態變化趨勢。因此，血清學診斷同樣也是早期診斷和感染現狀評價的的重要手段。

發明內容

本發明提供了抗體或其抗原結合片段，它們能特異地結合新型冠狀病毒NP蛋白。這些抗體是人源單克隆杭體。

根據本發明的一個方面，本發明提供了能與新型冠狀病毒NP蛋白特異性結合的抗體或其抗原結合片段，其中所述抗體或其抗原結合片段包含含有SEQ ID NO.1-3所示的序列的CDR區的重鏈可變區。

在本發明的具體實施方案中，重鏈可變區包含SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列。

本發明的抗體或其抗原結合片段進一步包含含有SEQ ID NO.5-7所示的序列的CDR區的輕鏈可變區。

在本發明的具體實施方案中，輕鏈可變區包含SEQ ID NO.8所示的氨基酸序列。

本發明的抗體或其抗原結合片段可以是免疫球蛋白G(IgG)、IgM、IgE、IgA或IgD分子，在一種優選的實施方案中，這種人源抗體是IgG。可能是IgG1、IgG2、IgG3、或IgG4亞型。這種抗體或其抗原結合片段可以從Fab片段、F(ab’)2片段、Fv片段、單鏈抗體或嵌合抗體衍生而來。

在一些實施方案中，本發明的抗體或其抗原結合片段可以作為融合蛋白的一部分。

根據本發明的另一個方面，本發明提供了包含前面所述的抗體或其抗原結合片段編碼序列的多核苷酸分子，特別是提供了編碼重鏈和輕鏈可變區、編碼重鏈和輕鏈CDR1到CDR3連續的氨基酸序列以及編碼單獨CDRs的核苷酸序列。

所述核酸分子包括SEQ ID NO.17和18所示的序列。

根據本發明的又一個方面，本發明提供了一種表達載體，其包含前面所述的多核苷酸分子。

進一步，所述表達載體還包含與前面所述的多核苷酸分子可操作性連接的表達控制序列。

根據本發明的又一個方面，本發明提供了一種宿主細胞，其被前面所述的多核苷酸分子或前面所述的表達載體所轉化。