[發明專利]一種利用混合溶劑減少乙基雙酮11a羥化過程中雜質的方法有效
| 申請號: | 202010460194.9 | 申請日: | 2020-05-27 |
| 公開(公告)號: | CN111593086B | 公開(公告)日: | 2023-05-05 |
| 發明(設計)人: | 陳海林;蔡嘯;宋盟軍;應娟;狄飛飛;汪洋;胡甜 | 申請(專利權)人: | 湖北葛店人福藥業有限責任公司 |
| 主分類號: | C12P33/10 | 分類號: | C12P33/10;C12N1/14;C12R1/645 |
| 代理公司: | 湖北武漢永嘉專利代理有限公司 42102 | 代理人: | 喬宇 |
| 地址: | 436070 湖北省鄂州市葛店*** | 國省代碼: | 湖北;42 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 利用 混合 溶劑 減少 乙基 11 過程 雜質 方法 | ||
1.一種利用混合溶劑減少乙基雙酮11α羥化過程中雜質的方法,其特征在于:包括如下步驟:
(1)采用保藏編號為CGMCC?No.3.17278的金龜子綠僵菌菌株,將綠僵菌菌種培養獲得綠僵菌菌體,收集菌體;
(2)收集菌體后投料轉化:將底物DL-18-甲基-4-雌烯-3,17-二酮采用由DMF和DMSO組成的混合溶劑溶解,所用混合溶劑中按體積比計,DMF:DMSO=1~20:1,將收集的菌體投入到底物中,將底物轉化為11α-羥基-18-甲基雌甾-4-烯-3,17-二酮。
2.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:所述步驟(2)的轉化時間為24-50h。
3.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:所述步驟(2)的轉化溫度為20-40℃。
4.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:底物的溶解溫度在40-90℃,所用混合溶劑的量為底物投料量的1~20倍。
5.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:所述底物和菌體的質量比例為1~10:1。
6.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:所述步驟(1)的培養方法為:
(1.1)將綠僵菌接種于馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基培養;
(1.2)將上述菌種在無菌條件下接種于裝有液體培養基的搖瓶中,旋轉式搖床培養得種子液;
(1.3)培養好的搖瓶種子液轉接至小罐培養,獲得菌體。
7.根據權利要求6所述的方法,其特征在于:步驟(1.1)中綠僵菌菌株培養溫度為25-32℃,培養時間3-10天;
所述步驟(1.2)中,搖床培養轉速為100-200rpm,培養溫度為25-32℃,培養時間10-20h;
所述步驟(1.3)中,小罐培養時間為16-48h,培養溫度為25-32℃,通氣量為0.2-1.2vvm。
8.根據權利要求6所述的方法,其特征在于:所述的液體培養基為7.5~10g/L葡萄糖、7.5~10g/L黃豆粉、3.5~5g/L蠶蛹粉。
9.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:11α-羥基-18-甲基雌甾-4-烯-3,17-二酮的轉化率達到60%,收率達到50%。
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