[發明專利]一種全封閉式樣本核酸提取純化裝置和方法

在審

• 申請號: 202010451606.2
• 申請日: 2020-05-25
• 公開（公告）號: CN111440706A
• 公開（公告）日: 2020-07-24
• 發明（設計）人: 李康
• 申請（專利權）人: 煙臺澳斯邦生物研發有限公司
• 主分類號: C12M1/12
• 分類號: C12M1/12;C12M1/00;C12N15/10
• 代理公司: 煙臺上禾知識產權代理事務所(普通合伙) 37234
• 代理人: 曲姮

本發明屬于核酸提取技術領域，尤其涉及一種全封閉式樣本核酸提取純化裝置和方法。本發明中，僅是在加入樣本時需要打開管蓋，保證了處理過程的封閉性；將樣本和裂解試劑分開，僅在離心狀態下才能混合；加熱裂解和加熱洗脫過程均為封閉操作，杜絕了蒸發問題。再結合磁力移動磁珠原理，節省耗材(磁套)和液體轉移加樣尖，全處理過程只需要兩個加樣尖，相比于現有技術，要節約2/3的加樣尖。本發明的所有操作均在密閉環境中進行，避免了樣本和核酸提取液的污染問題，處理有傳染風險的樣本時，對操作人員和實驗室環境有很好的保護作用。本發明的裝置和方法處理速度快，安全性更高，成本低，適合手工和自動化操作。

技術領域

本發明屬于核酸提取技術領域，尤其涉及一種全封閉式樣本核酸提取純化裝置和方法。

背景技術

固體生物檢材(包括樣本棉簽拭子、脫落細胞粘取器、剪取的服飾斑跡、繩索等)進行核酸提取的時候，一個必然的過程是進行裂解、離心去載體后吸取裂解產物進行后續的處理。這個處理過程目前主流的技術是用離心套管進行操作，無論手工操作還是自動化操作，都需要將裝有樣本載體的內管和裝有離心回收產物的外管進行分離，才能將裂解產物取出。而專利號CN208260788U公開的一種適合手工操作的雙向試管，顛倒后可以將離心產物轉移到另一個試管中，雖然不用取套管，但無法實現自動化步驟，需手工擰開蓋子取出裂解產物。

目前，磁珠法樣本核酸提取純化技術主要分為以下兩種：

一種是液體轉移法，將裂解產物和磁珠結合后，通過磁力裝置吸附磁珠，磁珠留在原位，用液體處理通道將廢液轉移棄掉，然后加入新的洗滌液洗滌磁珠，再將廢液丟棄，最后加入洗脫液，將磁珠結合的核酸洗脫下來，轉移走洗脫產物作為核酸樣本。而本方法耗時較長，使用耗材量較大，且在最后洗脫過程中需要加熱，有液體蒸發和氣溶膠產生的風險。

另一種是轉移磁珠法，通過磁棒配合磁套將磁珠在不同洗滌液、洗脫液之間轉移。本方法雖然耗時較短，但同樣因為洗脫加熱無法封閉，磁套震蕩或旋轉混勻容易產生交叉污染，并有氣溶膠產生的風險。

發明內容

本發明針對上述現有技術存在的不足，提供一種省時省力、避免污染且適合自動化批量處理樣本的全封閉式樣本核酸提取純化裝置和方法。

本發明解決上述技術問題的技術方案如下：一種全封閉式樣本核酸提取純化裝置，其特殊之處在于，包括封閉的樣本裂解容器和樣本純化容器；

其中，所述樣本裂解容器的一面向內并排開設有裂解液腔室、樣本腔室、提取液腔室和結合液腔室；所述裂解液腔室、樣本腔室、提取液腔室和結合液腔室的上部通過氣體通道依次連通；所述裂解液腔室、樣本腔室和結合液腔室內分別設有過濾器Ⅰ、過濾器Ⅱ和過濾器Ⅲ，所述過濾器Ⅰ、過濾器Ⅱ和過濾器Ⅲ分別將裂解液腔室、樣本腔室和結合液腔室分為上、下兩段；所述裂解液腔室的下段通過液體通道Ⅰ連通至所述樣本腔室的上段；所述樣本腔室的下段通過液體通道Ⅱ連通至所述提取液腔室；所述結合液腔室的下段通過液體通道Ⅲ連通至所述提取液腔室；所述樣本腔室頂端設有伸出樣本裂解容器的進樣口，所述進樣口外表面設有外螺紋，所述進樣口與內表面設有內螺紋的管蓋螺紋連接；所述裂解液腔室和結合液腔室的頂端均為錫箔封口；所述提取液腔室的頂端為可穿刺熱封膜；

所述樣本純化容器的一面向內并排開設有上部連通的混合腔室、第一洗滌腔室、第二洗滌腔室和洗脫腔室；所述混合腔室、第一洗滌腔室、第二洗滌腔室和洗脫腔室的頂端均為可穿刺熱封膜；所述混合腔室內設有可在外部磁力作用下移動的磁珠。

進一步，所述過濾器Ⅰ的孔徑為1-20μm；所述過濾器Ⅱ的孔徑為0.22-0.85μm；所述過濾器Ⅲ的孔徑為0.22-0.85μm。

采用上述進一步方案的有益效果是，控制過濾器的孔徑，從而避免堵塞各液體通道。

進一步，所述液體通道Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的管徑為0.5-3mm。