[發(fā)明專利]一種全封閉式樣本核酸提取純化裝置和方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010451606.2
• 申請(qǐng)日: 2020-05-25
• 公開（公告）號(hào): CN111440706A
• 公開（公告）日: 2020-07-24
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李康
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 煙臺(tái)澳斯邦生物研發(fā)有限公司
• 主分類號(hào): C12M1/12
• 分類號(hào): C12M1/12;C12M1/00;C12N15/10
• 代理公司: 煙臺(tái)上禾知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 37234
• 代理人: 曲姮

1.一種全封閉式樣本核酸提取純化裝置，其特征在于，包括封閉的樣本裂解容器和樣本純化容器；

其中，所述樣本裂解容器的一面向內(nèi)并排開設(shè)有裂解液腔室、樣本腔室、提取液腔室和結(jié)合液腔室；所述裂解液腔室、樣本腔室、提取液腔室和結(jié)合液腔室的上部通過氣體通道依次連通；所述裂解液腔室、樣本腔室和結(jié)合液腔室內(nèi)分別設(shè)有過濾器Ⅰ、過濾器Ⅱ和過濾器Ⅲ，所述過濾器Ⅰ、過濾器Ⅱ和過濾器Ⅲ分別將裂解液腔室、樣本腔室和結(jié)合液腔室分為上、下兩段；所述裂解液腔室的下段通過液體通道Ⅰ連通至所述樣本腔室的上段；所述樣本腔室的下段通過液體通道Ⅱ連通至所述提取液腔室；所述結(jié)合液腔室的下段通過液體通道Ⅲ連通至所述提取液腔室；所述樣本腔室頂端設(shè)有伸出樣本裂解容器的進(jìn)樣口，所述進(jìn)樣口外表面設(shè)有外螺紋，所述進(jìn)樣口與內(nèi)表面設(shè)有內(nèi)螺紋的管蓋螺紋連接；所述裂解液腔室和結(jié)合液腔室的頂端均為錫箔封口；所述提取液腔室的頂端為可穿刺熱封膜；

所述樣本純化容器的一面向內(nèi)并排開設(shè)有上部連通的混合腔室、第一洗滌腔室、第二洗滌腔室和洗脫腔室；所述混合腔室、第一洗滌腔室、第二洗滌腔室和洗脫腔室的頂端均為可穿刺熱封膜；所述混合腔室內(nèi)設(shè)有可在外部磁力作用下移動(dòng)的磁珠。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的全封閉式樣本核酸提取純化裝置，其特征在于，所述過濾器Ⅰ的孔徑為1-20μm；所述過濾器Ⅱ的孔徑為0.22-0.85μm；所述過濾器Ⅲ的孔徑為0.22-0.85μm。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的全封閉式樣本核酸提取純化裝置，其特征在于，所述液體通道Ⅰ、Ⅱ、Ⅱ的管徑為0.5-3mm。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的全封閉式樣本核酸提取純化裝置，其特征在于，所述的裂解液腔室為多個(gè)。

5.一種利用權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述全封閉式樣本核酸提取純化裝置進(jìn)行核酸提取純化的方法，其特征在于，步驟如下：

(1)混料：向裂解液腔室中加入裂解液；向結(jié)合液腔室中加入結(jié)合液；將待提取的固體生物檢材塞入樣本腔室中，蓋上管蓋；將樣本裂解容器置于離心機(jī)，在200-500r/min轉(zhuǎn)速條件下進(jìn)行低速離心，在離心力的作用下，裂解液腔室中的裂解液經(jīng)過液體通道Ⅰ進(jìn)入樣本腔室，直至裂解液完全覆蓋固體生物檢材，停止離心；

(2)裂解：將樣本裂解容器加熱至37-95℃，固體生物檢材完成裂解；再將樣本裂解容器置于離心機(jī)，在2000-12000r/min轉(zhuǎn)速條件下進(jìn)行高速離心，在離心力的作用下，樣本腔室中的核酸提取液經(jīng)過液體通道Ⅱ進(jìn)入提取液腔室，同時(shí)，結(jié)合液腔室內(nèi)的液體也經(jīng)過液體通道Ⅲ進(jìn)入提取液腔室；

(3)純化：通過提取液腔室頂端的可穿刺熱封膜，用移液器將提取液腔室中的核酸提取液取出至樣本純化容器；混合腔室中，核酸提取液與磁珠結(jié)合，在外部磁力作用下吸附磁珠沿內(nèi)壁移動(dòng)至第一洗滌腔室、第二洗滌腔室，最后進(jìn)入洗脫腔室，在37-70℃條件下加熱洗脫；即得純化的核酸提取液。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，磁珠分別移動(dòng)至第一洗滌腔室、第二洗滌腔室時(shí)，撤離外部磁力，磁珠在第一洗滌腔室、第二洗滌腔室中分別震蕩懸浮3次。