[發明專利]一種基于CD90posi細胞檢測腫瘤的試劑盒在審
| 申請號： | 202010443528.1 | 申請日： | 2020-05-22 |
| 公開（公告）號： | CN111549138A | 公開（公告）日： | 2020-08-18 |
| 發明（設計）人： | 劉建平;蘇正;張克幍 | 申請（專利權）人： | 中山大學孫逸仙紀念醫院 |
| 主分類號： | C12Q1/6886 | 分類號： | C12Q1/6886;C12Q1/6869 |
| 代理公司： | 北京中譽至誠知識產權代理事務所(普通合伙) 11858 | 代理人： | 張平力 |
| 地址： | 510120 廣東省廣州市沿*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 基于 cd90posi 細胞 檢測 腫瘤 試劑盒 | ||
1.一種基于CD90posi細胞檢測腫瘤的試劑盒，其特征在于，
利用磁珠偶聯CD90posi抗體對腫瘤細胞進行分離，所述腫瘤的組織經過Roche LRGEBlends組織消化體系分散為細胞懸液再分選；所述肝癌的細胞系97L、Huh7直接用胰酶消化。
2.根據權利要求1所述的基于CD90posi細胞檢測腫瘤的試劑盒，其特征在于，
步驟S1：CD90posi細胞分選；
步驟S2：CircRNA高通量測序；
步驟S3：檢測所述CircRNA的功能。
3.根據權利要求3所述的基于CD90posi細胞檢測腫瘤的試劑盒，其特征在于，所述CircRNA高通量測序利用肝癌細胞與所述磁珠偶聯CD90posi抗體共孵育通過磁場柱分離洗脫得到。
4.根據權利要求1所述的基于CD90posi細胞檢測腫瘤的試劑盒，其特征在于，所述CircRNA在肝癌細胞中CD90posi細胞的差異表達通過獲取肝癌細胞中CD90posi亞群總RNA構建CircRNA文庫，進行CircRNA的高通量測序，所得結果進行生物信息學分析采集差異表達的分子。
5.根據權利要求1所述的基于CD90posi細胞檢測腫瘤的試劑盒，其特征在于，所述CircRNA在肝癌組織中CD90posi細胞的差異表達通過分離患者的腫瘤組織CD90posi細胞總RNA，進行CircRNA高通量測序，生信分析CircRNA的表達差異進行富集分析。
6.根據權利要求1所述的基于CD90posi細胞檢測腫瘤的試劑盒，其特征在于，采用pLCDH-ciR過表達質粒構建CircRNA過表達體系，采用sh-CiRcRNA的干涉質粒作為CircRNA沉默體系，感染細胞進行相關功能檢測。
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