[發明專利]對豬瘟野毒及其疫苗、非洲豬瘟病毒、豬非典型瘟病毒鑒別診斷的基因芯片以及檢測方法

有效

• 申請號: 202010436452.X
• 申請日: 2020-05-21
• 公開（公告）號: CN111575407B
• 公開（公告）日: 2023-06-20
• 發明（設計）人: 張乾義;王琴;趙啟祖;徐璐;夏應菊;萬建青;郎洪武;鄒興啟;李翠;朱元源;徐嫄;王兆
• 申請（專利權）人: 中國獸醫藥品監察所
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/6837;C12N15/11;C40B40/06
• 代理公司: 北京唐頌永信知識產權代理有限公司 11755
• 代理人: 劉偉;王維

1.一種試劑盒，其包括：

基因芯片，其是用于對豬瘟野毒及其疫苗、非洲豬瘟病毒、豬非典型瘟病毒進行鑒別的基因芯片，其中，該基因芯片包括：用于對豬瘟野毒及其疫苗、非洲豬瘟病毒、豬非典型瘟病毒進行鑒別的探針組合物，以及載體材料，所述探針組合物固定在載體材料上；該探針組合物的組成為：

針對豬瘟野毒的探針CSFV-W-P，其序列如SEQ?ID?NO.1：CCCTGGGTGGTCTAAGTCCTGAGTACAG所示，

針對豬瘟疫苗的探針CSFV-V-P，其序列如SEQ?ID?NO.2：ATGCAGGAGGAGATAACCTTGCAGCC所示，

針對非洲豬瘟病毒的探針ASFV-P，其序列如SEQ?ID?NO.3：TCACTACGGCTGATCTTGTGG所示，以及

針對豬非典型瘟病毒的探針APPV-P，其序列如SEQ?ID?NO.4：ATGCCCACGTCCACCCAAGCC所示；

所述基因芯片的載體材料為改性硅膠膜；

除了固定有上面4條靶標探針序列，所述基因芯片的每個孔還固定有一條芯片反應質控探針和兩條PCR反應質控探針；

所述試劑盒還包括引物組合物，其是對豬瘟野毒及其疫苗、非洲豬瘟病毒、豬非典型瘟病毒進行鑒別時所使用的擴增引物，其包括：

針對豬瘟野毒CSFV-W的5’UTR保守區域設計引物，分別為CSFV-F1：SEQ?ID?NO.5：GGAGGGACTAGCCRTAGTG和CSFV-R1：SEQ?ID?NO.6：ACGTCGAACTACTGACGACTG；

針對豬瘟疫苗CSFV-V的NS5B保守區域設計引物，分別為CSFV-F2：SEQ?ID?NO.7：CCTTCGGGGAGAAAGTAACGAT和CSFV-R2：SEQ?ID?NO.8：CCTACCACAGTCACGGCT；

針對非洲豬瘟病毒ASFV的p72保守區域設計引物，分別為ASFV-F：SEQ?ID?NO.9：TTTTATATTAGTTGGGACACGGA和ASFV-R：SEQ?ID?NO.10：GAAAGTTAATAGCAGATGCCGAT；以及

針對豬非典型瘟病毒APPV的5’UTR保守區域設計引物，分別為APPV-F：SEQ?ID?NO.11：CAGACGTCACCGAGTAGTACACC和APPV-R：SEQ?ID?NO.12：CCCAGGTCCACCACCGAT；

所述試劑盒用于對豬瘟野毒及其疫苗、非洲豬瘟病毒、豬非典型瘟病毒進行鑒別診斷。

2.根據權利要求1所述的試劑盒，其還包括：

質控引物、質控質粒、陽性對照、陰性對照、熱反應酶、無菌無核酸酶水、辣根過氧化物酶、變性液A、洗脫液B、洗滌液C以及TMB顯色液。