[發明專利]外周血外泌體中Notch3蛋白作為分子標記的應用及一種檢測試劑盒

在審

• 申請號: 202010434223.4
• 申請日: 2020-05-21
• 公開（公告）號: CN111521826A
• 公開（公告）日: 2020-08-11
• 發明（設計）人: 江海松;胡建容;王偌
• 申請（專利權）人: 江海松
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68
• 代理公司: 上海海貝律師事務所 31301
• 代理人: 范海燕

1.外周血外泌體中Notch 3蛋白作為分子標記在制備遺傳性腦血管疾病檢測試劑盒中的應用。

2.一種遺傳性腦血管疾病檢測試劑盒，其特征在于，包括提取外周血外泌體的試劑以及檢測Notch 3蛋白的抗體。

3.權利要求2所述遺傳性腦血管疾病檢測試劑盒的使用方法，其特征在于，包括以下步驟：

S1：取待檢測對象的外周血樣品并提取其中的外泌體；

S2：提取外泌體中蛋白并利用檢測Notch 3蛋白的抗體對Notch 3蛋白定量；

S3：根據定量結果與正常樣本中Notch 3蛋白的量進行比較，得出待檢測對象遺傳性腦血管疾病進展程度。

4.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，所述步驟S1具體包括：

收集待檢測對象血液于EDTA抗凝管中，放置4小時后，3000×g離心1分鐘，取上層血漿于2ml無菌管中，存放于-80℃冰箱待用；

從-80℃取出血漿放在4℃中溶化，然后取出250μl血漿于無菌管中，3000×g離心15min去除細胞和細胞碎片，轉移上清液于無菌管中，加入63μlExoQuick外泌體沉淀劑，通過顛倒，輕彈管壁混勻，放置于4℃冰箱里30min，然后1500×g離心30min，去除上清液，然后將剩余的液體重新1500×g離心5min，吸去管里所有液體，得外泌體。

5.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，所述步驟S2具體包括：將外泌體反復凍融3次后獲得蛋白，通過酶聯免疫吸附雙抗體夾心法檢測Notch 3蛋白含量。